主题：【求助】过SPE柱的问题，急请高手解惑！
浏览 |回复5
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：qingyu906
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
发表于： 09:54:23
想净化测定油炸物中的多环芳烃，过了几次硅胶柱均不成功。就用PAHs的标样尝试了下，参照文献中去油脂的方法，将100微升1ppm的PAHs标样与300微升正己烷/丙酮（1:1）混匀，100mg/1ml的硅胶小柱用1ml正己烷活化后，上样，用1ml丙酮/正己烷（3:1）淋洗，1.5ml正己烷/二氯甲烷（1:1）洗脱，分别收集上样后、淋洗、洗脱流出液，氮气吹至0.3微升，上GC-MS测试。可结果是文献中PAHs的回收率能在80%以上，而我做的不管是标样还是实际样品，回收率都很差，大部分目标物根本没有。是淋洗溶剂选的不合适，还是没有控制流速的原因？各位有没有做过类似的净化啊。如下，三张图分别为：高浓度标样、淋洗液、洗脱液
该帖子作者被版主
阿三 加 1 积分，
2经验，加分理由：欢迎求助
9:56:02 Last edit by qingyu906
mingzhidage
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：mingzhidage
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
坐等高人解答！
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：junqiwudi
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
楼主用1ml丙酮/正己烷（3:1）淋洗 估计把目标物都洗下去了 改个条件试试
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：xufangdan
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
硅胶柱洗脱溶剂选择不合理啊，洗脱极性都赶不上淋洗的极性。
该帖子作者被版主
阿三 加 1 积分，
2经验，加分理由：热心奖励
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：qingyu906
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 helo(xufangdan) 发表:硅胶柱洗脱溶剂选择不合理啊，洗脱极性都赶不上淋洗的极性。感谢你的热心回复，正相填料都是洗脱极性肯定要大于淋洗极性，是这样吗？
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：junqiwudi
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 qingyu906(qingyu906) 发表:原文由 helo(xufangdan) 发表:硅胶柱洗脱溶剂选择不合理啊，洗脱极性都赶不上淋洗的极性。感谢你的热心回复，正相填料都是洗脱极性肯定要大于淋洗极性，是这样吗？应该是这样的 而且保证淋洗的时候不能把样品洗下来呀固相萃取小柱的原理，使用方法，注意事项
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口&您现在的位置：&>&&>&&>&
共有&15&人回复了该问答求助固相萃取柱的使用方法
固相萃取柱使用步骤，注意事项及如何控制进样流速，淋洗后抽干到何种程度，一次性使用指的是针对一种样品还是只能使用一次能否重复活化使用。我的固相萃取柱是c18 6ml 500mg.谢谢。
回复于： 20:45:00关键就是脱水很是麻烦。如果大家有好的方法可以介绍一下啊！
回复于： 17:15:00可以这样控制流速：让真空装置上的对称的两个金属阀漏出一点气至于漏多少取决于你要求的流速
回复于： 19:14:00原文由 yanchen 发表:“在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分”不太明白是什么意思？这句话有问题，丙酮一洗，大部分有机物就跑了，还有多少东西能留给你检测？淋洗液和洗脱液的极性是很有讲究的，C18柱一般是先用水或含一定比例甲醇的水淋洗杂质，用甲醇含量更高的水或纯甲醇洗脱被测物，比例优化得好可提高回收率，减少杂质干扰。此外，从活化到洗脱被测物前的整个过程，C18 SPE柱不能干，但如果需要，洗脱前可以尽可能抽干柱体里的溶液。当然，如果你的被测物极性很强，就不大可能保留在柱体内，即使用水也能洗脱下来，就没有办法了，这时过SPC柱，就只能保留部分杂质了。
回复于： 20:42:00原文由 hotdoglet 发表:您可以试一下，回收率会低一些的，因为C18填充物中含有水。再者，乙酸乙酯的基线不是很好（用ECD时）。我想直接洗脱应该可以的，只要在洗脱后过无水硫酸钠的玻璃小柱脱水后就不会影响测定了
回复于： 11:41:00使用C18固相萃取柱，如果我要的目标成分可以用乙酸乙酯洗脱，那么洗脱前我是否可以不做淋洗这一步了，也就是说上样后直接洗脱。这样做可以吗？thank you！
快速回复【花三五分钟，帮别人解决一个问题，快乐自己一天！】
回复于： 17:23:00
使用的步骤：清洗，活化，样品过柱富集，洗脱。注意事项：在活化的过程中不能使萃取柱的填充物接触到空气，活化时最好能用活化试剂浸泡一会填充物。洗脱时尽量将水分抽干。一般来说，将填充物中的水完全抽干是不可能的，因此在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分。至于重复使用的问题，当分析实际样品的时候，我们一般是不重复的，但是在摸索萃取条件时，重复使用还是可以的。[marquee]欢迎到微波化学做客！[/marquee]
回复于： 20:40:00
根据被测物质的不同，步骤也不尽相同。一般是先活化，然后装载样品，有的直接收集过柱液，有的要淋洗后再洗脱，具体样品具体分析。是否能重复用可以根据被测样品的过柱回收率定，如果回收率很高就可以重复使用
回复于： 21:42:00
“在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分”不太明白是什么意思？
回复于： 21:49:00
请问如何控制固相萃取的流速，我用的是真空装置，活化，上样，淋洗，洗脱各步骤的流速控制为多少？谢谢
回复于： 16:31:00
根据本人做的试验，一般来说，固相萃取的流速是不需要控制的；如果想要控制的话，可以对真空泵的压力进行调节就可以了。
回复于： 19:14:00
原文由 yanchen 发表:“在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分”不太明白是什么意思？这句话有问题，丙酮一洗，大部分有机物就跑了，还有多少东西能留给你检测？淋洗液和洗脱液的极性是很有讲究的，C18柱一般是先用水或含一定比例甲醇的水淋洗杂质，用甲醇含量更高的水或纯甲醇洗脱被测物，比例优化得好可提高回收率，减少杂质干扰。此外，从活化到洗脱被测物前的整个过程，C18 SPE柱不能干，但如果需要，洗脱前可以尽可能抽干柱体里的溶液。当然，如果你的被测物极性很强，就不大可能保留在柱体内，即使用水也能洗脱下来，就没有办法了，这时过SPC柱，就只能保留部分杂质了。
回复于： 21:19:00
原文由 yanchen 发表:“在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分”不太明白是什么意思？这个意思是：因为实验条件下，抽真空时并不能将填充物中的水份完全的去除，如果在这种情况下用淋洗液洗脱的话，会使得有机溶剂与吸附物得不完全接触，洗脱得效果就会不好。因此可以用极性溶剂如丙酮，先将填充物中的水份洗下来，然后再用别的溶剂洗脱，将丙酮和洗脱溶剂合并后过无水硫酸钠除水。这个只是本人在试验中采用的方法，我的试验是用来萃取水中的有机氯农药的。[marquee]欢迎到微波化学做客！[/marquee]
回复于： 16:45:00
似乎可以用氮气吹将水除去。这样可以避免用溶剂除水。
回复于： 11:41:00
使用C18固相萃取柱，如果我要的目标成分可以用乙酸乙酯洗脱，那么洗脱前我是否可以不做淋洗这一步了，也就是说上样后直接洗脱。这样做可以吗？thank you！
回复于： 11:51:00
重申一下“在淋洗的时候，可以先用丙酮，再用别的有机溶剂洗脱，然后合并除去水分”的意思：用C18商品柱做水中的有机氯农药的时候，当水样过完柱子后，理论应该用非极性的有机溶剂洗脱（如正己烷），但是，由于C18填充物是有一定的高度的，其中的水在抽真空的条件下也是不容易除去的。因此在用正己烷洗脱之前，用丙酮淋洗一下，然后再用正己烷洗脱，再将这两部分的淋洗液合并，此时，丙酮＆目标物会溶解到正己烷中，水会在底层，只要吸出正己烷就行了。
回复于： 11:54:00
原文由 yanchen 发表:使用C18固相萃取柱，如果我要的目标成分可以用乙酸乙酯洗脱，那么洗脱前我是否可以不做淋洗这一步了，也就是说上样后直接洗脱。这样做可以吗？thank you！您可以试一下，回收率会低一些的，因为C18填充物中含有水。再者，乙酸乙酯的基线不是很好（用ECD时）。
回复于： 20:39:00
一般洗柱子要求不高，活化的时候速度不能太快，但是过程中不能让柱子变干。进水样后的流速一定不要太快！一般在10--15ml/min才能有较好的效果。装置应该还配有流量控制阀，用那个就不用担心了，一般需要单独购买这个流量控制阀，我买的大约10个阀门一千多一点。
回复于： 20:42:00
原文由 hotdoglet 发表:您可以试一下，回收率会低一些的，因为C18填充物中含有水。再者，乙酸乙酯的基线不是很好（用ECD时）。我想直接洗脱应该可以的，只要在洗脱后过无水硫酸钠的玻璃小柱脱水后就不会影响测定了
回复于： 20:45:00
关键就是脱水很是麻烦。如果大家有好的方法可以介绍一下啊！
回复于： 17:15:00
可以这样控制流速：让真空装置上的对称的两个金属阀漏出一点气至于漏多少取决于你要求的流速
问答用户推荐 回答数：0 回答数：0
未解决问题93关于复杂基质样品SPE净化方法开发的几点讨论系列一
上亿文档资料，等你来发现
93关于复杂基质样品SPE净化方法开发的几点讨论系列一
关于复杂基质样品SPE净化方法开发的几点；讨论系列一；李建中，宋兰坤，庄淑萁，YapSweeLee；沃特世公司，上海，中国；样品前处理在当今色谱分析过程中是一个既耗时又极易；图1色谱分析误差来源分布图2样品前处理在整个分析；从SPE技术问世以来，在样品分析方面的应用已有数；关于SPE方法开发策略，众所周知一般有三种：策略；由于SPE类型多样，应用领域广泛，那
关于复杂基质样品SPE净化方法开发的几点讨论系列一李建中，宋兰坤，庄淑萁，Yap Swee Lee沃特世公司，上海，中国样品前处理在当今色谱分析过程中是一个既耗时又极易引入误差的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果。因此，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法和技术是一个重要问题。由于各类样品尤其生物样本属于复合基质体系，多含有蛋白、脂类,碳水化合物、色素等成分，复杂的基质背景会对被分析目标化合物的提取、分离、净化和测定等带来很大的麻烦,因此样品前处理不仅复杂困难，而且对于分析结果的准确可靠和灵敏具有决定性作用。图 1 色谱分析误差来源分布
图 2 样品前处理在整个分析过程中消耗时间比例 固相萃取( Solid Phase Extraction,简称SPE) 是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。SPE是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。因其具有安全、回收率高, 重现性好、操作简便、快速、应用范围广、易实现自动化操作等特点，从而显示出良好的发展前景，在相关领域如生物、临床制药、环境、食品安全、有机合成、石油化工等的应用越来越多。从1978年Waters公司首先将一次性SPE商品柱投放到市场以来，据不完全统计，SPE商品柱一直以每年10%的增长速度迅速发展。从SPE技术问世以来，在样品分析方面的应用已有数以万计的专著和文献报道，关于其原理及分类本文不再额述，主要就SPE方法开发选择及应用中常遇到的一些问题进行讨论。关于SPE方法开发策略，众所周知一般有三种：策略一为保留-清洗-洗脱（Retention-Cleanup-Elution）；策略二为通过净化（pass-through cleanup）；策略三为基质分散（Quechers）。其中策略一最为常用，且效果净化最好；策略二和策略三虽然不如第一种策略净化效果好，但操作简便快速，适用于极性范围广泛的多组分化合物的净化。由于SPE类型多样，应用领域广泛，那么如何从纷繁复杂的信息中选取你需要的内容或正确的解决方案会经常困扰着大多数分析工作者尤其是刚开始接触到SPE净化技术的研究人员。所以对于准备采用SPE技术作为分析样品的净化前处理方法的研究者来说，首先要深刻的了解掌握你所要分析化合物的理化性质、稳定性、分子结构，尤其是化合物分子中的特征性官能团和取代基。上述这点当然为大多数研究人员所了解，但是应该指出的是大多数研究者会忽略一个同样重要的考虑因素――样品基质，即被分析化合物来源于何种类型的样品基质中。部分研究者正是由于只考虑分析化合物本身的性质特点而忽略了样品基质的影响，采用了SPE净化方法却并没有得到理想的净化效果和回收率。以食品中苏丹红染料的分析为例，如果从苏丹红结构及极性考虑既可以采用反相C18-SPE柱也可以采用Florisil-SPE柱，但是由于这类工业染料色泽鲜艳稳定、脂溶性强的特点，被非法的添加到含有辣椒的制品中，对于辣椒类制品基质来说，主要的基质和干扰物为油脂和辣椒红素等。那么采用反相C18-SPE柱时通过反相吸附机理虽然对苏丹红有较强的保留，但对样品中含有的大量油脂和色素也同样具有较强的保留而无法清洗除去，并且在洗脱过程中与苏丹红一起被洗脱下来，无法起到净化的目的，使得仪器的测定变得非常困难。相反当采用Florisil-SPE柱时，苏丹红通过结构中的羟基与固相填料中的硅羟基以氢键结合力而被保留，油脂无法保留而被淋洗除去，接下来采用合适比例强度的溶剂进行洗脱，由于辣椒红素与固相吸附剂的结合力普遍强于苏丹红，所以当苏丹红被洗脱的时候大多数辣椒红素类干扰物被留在了SPE柱上，从而达到了有效的净化效果。可见在SPE方法开发时，首先要了解被分析化合物的性质，更为重要的是还要了解此化合物来源于何种样品及样品基质的组成特点。这样才能为选择开发合适的SPE柱类型及淋洗、洗脱条件提供保障。“良好的开始，意味着成功了一半”。包含各类专业文献、生活休闲娱乐、外语学习资料、高等教育、行业资料、中学教育、文学作品欣赏、93关于复杂基质样品SPE净化方法开发的几点讨论系列一等内容。
　两种净化法用于氟喹诺酮类药物的 SPE 样品前处 理...繁琐复杂的操作以及正己烷的使用,开发出适合LC/MS...因而在其生理 基质中很少发现该类药物的原药,检测... 　方法,开发了 用于蔬菜和水果上的多农残检测样品前...⑤SPE 净化 过程。a 活化:用 10mL 乙腈/甲苯(3:...从而保证了复杂基质中农残定性定量分析的准确性, ... 　用于复杂基质中分子量差别较大的物质的分离、净化,...灵敏度与准确性,同时延长色谱柱使用寿命的样品前处理...法名称】和“Method Type”中选择“SPE”然后点击“... 　复杂基质样品中痕量六六六、滴滴涕测定方法研究 摘要:本文针对测定复杂基质样品中...关键词:复杂基质;固相萃取(spe) ;酸化处理 1 六、七十年代大量使用的六六六... 　洗脱等几个步骤达到从复杂基质中萃取、浓缩和净化...SPE 小柱使用步骤、SPE 方法开发的基本程序以及 SPE...SPE)是一种用途广泛而且 越来越受欢迎的样品前处理... 　已经开发出几种样品的制备方法,包括固相萃取(SPE),...SPE 是广泛应用于样品制备的样品净化和浓缩技术。...这样结合的一个优势是它可用于复杂基质样品。 Melw... 　ASE 萃取/GPC―SPE 净化/GC―MS 测定茶叶中的有...净化一气质法测定茶叶中的有机磷残留 的分析方法。...阴性茶叶样品,按上述步骤操作,用于 配置基质混合标准... 　处理固体、半固体 和粘性液体样品,提取、净化一步...但MSPD 较SPE 复杂,它将样品分散到整个柱中,并与...基质分散的固相萃取法,将2g 氨基与样品的2ml 乙腈... 　进行现场检测,原为检测技术使样品无需复杂的净化 ...2.1.5 基质固相分散 应用 SPE 技术需要样品处于无...首次发表有关吹扫捕集色谱法测定水中挥发 性有机物...&& 查看话题
1-氨基-4甲基哌嗪的萃取，求助 急急急
在线等！！！！！！！！！！！！
水相里三个物质都是哌嗪类都易溶于水，要求是将水中的物料萃取到有机物中或者从水中提取出来，我已经试了好几种萃取溶剂，正丁醇、EA、氯仿、丁酮等等。。都试遍了，效果不是很好，水相中性的我调成碱性，增加水的饱和度萃取，效果都不是很理想，现在想用大孔吸附树脂试试，但是不知道怎么用，用什么型号。。。请问有没有一种比较好的萃取方法，或者从水中置换出来，事情挺急的，在线等
上个BOC再翠，然后脱Boc : Originally posted by soulink at
上个BOC再翠，然后脱Boc 水相里产物比较多 比较杂，上BOC会增加成本 : Originally posted by 你咬我啊 at
水相里产物比较多 比较杂，上BOC会增加成本... 呵呵，如果是工业生产就要另想办法了。离子交换树脂可以试试 : Originally posted by soulink at
呵呵，如果是工业生产就要另想办法了。离子交换树脂可以试试... 正想用这个方法，可是不知道怎么搞