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关于色谱柱能不能反冲的问题争议很大，一直困扰了我很久！！
关于HPLC色谱柱反冲的问题（已咨询售后）
关于色谱柱能不能反冲的问题争议很大，一直困扰了我很久，我新定的安捷伦TC-C18（2），粒径是5um，色谱柱在一次使用后压力上升了50bar，以前用纯甲醇冲的时候压力只有68bar，现在用纯甲醇冲，压力达到了128bar，而用95%水+5%甲醇冲是压力更达到了170bar。
& && &于是我电话咨询了安捷伦的售后，别人给我的建议是将色谱柱用纯甲醇，乙腈，异丙醇依次低流速反冲，我问她反冲对柱子的影响会不会很大，她保证说反冲是没有任何影响的。
& && &对于色谱柱反冲的问题，大家有什么看法啊？
反冲不是万万不能，实在没办法时反冲一下有可能会有意想不到的结果。
换句话说反冲柱子是死马当活马医。 Originally posted by zgf at
反冲不是万万不能，实在没办法时反冲一下有可能会有意想不到的结果。
换句话说反冲柱子是死马当活马医。 死马当活马医？我的柱子还没到死的地步吧，跑流动相的时候压力是168bar左右，我就是不想它的压力一直升高才考虑是否反冲的。你的意思是不要反冲，等柱子压力升高到不能用的时候再反冲吗？ Originally posted by zhengysigu at
死马当活马医？我的柱子还没到死的地步吧，跑流动相的时候压力是168bar左右，我就是不想它的压力一直升高才考虑是否反冲的。你的意思是不要反冲，等柱子压力升高到不能用的时候再反冲吗？ 是，这种情况你可以考虑梯度冲洗。柱压升高有可能是里面有东西没有冲出来。先用大比例水90%~95%，冲一会在过渡80%20%过渡一下最后再用纯乙腈冲1~2个小时看不看有没有效果。
还是不行可以低流速反冲一下（流速一定要低最好不超过0.3）。反冲的效果也不一定明显。最好就是做好预防，装个保护柱。
不能反冲的原因是反冲有可能造成色谱柱内填充物料发生移动，对柱子产生损害。所以一定要低流速冲。 可以先以甲醇，乙腈或30%异丙醇-水来正向冲洗，将柱子中的填料彻底清洗活化。反冲色谱柱不建议你使用，因为会把柱子中的填料冲散，填料断面也会不平整，造成你日后使用柱效降低或峰型异常。
可以尝试梯度洗脱一下，看看能否将柱子中的一些杂质冲出来。 Originally posted by zhengysigu at
关于HPLC色谱柱反冲的问题（已咨询售后）
关于色谱柱能不能反冲的问题争议很大，一直困扰了我很久，我新定的安捷伦TC-C18（2），粒径是5um，色谱柱在一次使用后压力上升了50bar，以前用纯甲醇冲的时候压力只有 ... 据我所知，安捷伦XDB&&SB等系列的液相色谱柱可以反冲，而且可以反向使用，柱效和正向用没有什么区别的，安捷伦耗材应用工程师也证实过反向使用是可以的。 反冲对柱子有没有影响与柱子有关系，据我所知菲罗门的柱子可以反冲。 应该不能反冲吧 我用资生堂的柱子&&压力每天增高一点 反冲就好了 反冲会造成柱头塌陷，冲后柱压甚至可能比新柱子还低，柱效也可能会降低，不是什么好事 可以反冲，我是有试过反冲，先低流速低浓度冲半个小时再用高浓度的冲半个小时，基本上压力会降下来，柱效有稍微提高的。 反冲是没有什么问题的。
实际上HPLC色谱柱的填装压力比最大使用压力高很多（通常会高2倍）。如果装柱时使用了恰当的匀浆剂，并且分配一定的时间使柱床稳定，一支填装良好的色谱柱是完全可以双向使用的。需要反向使用色谱柱的情况包括：柱转换时的反冲、柱头被强保留物质吸附污染的色谱柱清洗（反冲的冲洗路径更短更合理）、冲洗残留在筛板上的颗粒物以降低柱压或防止柱压升高。
反向使用色谱柱有一个例外，就是生产商在色谱柱的进样端使用了孔径更大筛板的情况， 反向使用可能会将填料从柱床冲出。色谱柱在工厂填装时，出口端的筛板孔径必须比色谱柱中最小颗粒的粒径还要小。譬如，色谱填料平均粒径是5μm，粒径分布范围是3–7 μm, 出口端筛板孔径必须小于3μm ，使填料没有可能从柱床跑到色谱柱筛板外面。大多数生产厂家选择的筛板孔径是2-μm。 至于某些厂家两端的柱筛板孔径不一样，一般是进样端大些，出样端小些。
进样端大的原因：色谱柱被污染都是进样端首先被污染，尤其是进样端的柱筛板被固体颗粒堵牢了，一个 0.5-μm的筛板会比一个 2-μm的筛板被堵得快，导致柱压极高，色谱柱就没有办法用下去了，如果进样端的柱筛板孔径越大，固体颗粒就越不容易堵在这里。通常色谱柱上就会标一个箭头表示只能在一个方向使用。
出样端的柱筛板孔径小些，原因是：怕填料流失。
但现在不一样了，绝大多数厂家都采用了对称的筛板。
至于现在为什么有人认为不能反冲，是因为色谱柱经过一段时间的使用，里面的填料已经得到了很好的平衡，越接近柱尾端填料相对越密实。一旦反冲或反接，填料的分布状态又会被打乱，会影响到分离。但是在实际试验过程中，分离常规物质时候影响并不是很大。 我师兄反冲过一次，不过当时是犯了迷糊不小心装反了冲的，3ml/min，属于高速了吧，好像也没什么感觉 反冲不能用高流速的，否则柱中填料会松动。
有条件的话，最好了解下色谱柱填装工艺。 可不可以反冲得看你的柱子两头的孔径是否一致，若不一致肯定不行。
若一致，一般来说，低流速反冲是没有任何问题的。因为柱子在制备的时候，是在40MPa左右（也可能更高）条件下进行填充的，1.0ml/min的流速的柱压顶多十几MPa，怎么可能对柱床造成明显的影响呢？
有人说：“反冲可能使键合相碳链一边倒，与原来的方向相反，会影响柱子的分离效果。”&&众所周知，只有碳链在完全自由舒展的条件下，柱效是最好的，照上面的说法，反冲不刚好把碳链恢复到自由舒展的状态，这样不更好吗？ 其实，实验早已证明：在至少5%的有机相中，碳链是可以完全自由舒展的。
再者，强保留物质基本都是保留在柱子头部，因此反冲可以事半功倍。正冲则可能污染整个柱子。 不到万不得已不要反冲，想想，整天让你朝一头跑，突然给你掉了个头，肯定有影响的... 可以的，我们实验室以前柱子有点堵压力偏高的时候就是用95%乙腈-5%水反冲。没有问题 现在很多色硅胶基质的色谱柱都可以反冲了，反冲的时候用低流速（大概0.2-0.3min/ml)效果会好一些。安捷伦的工程师都说可以反冲了，那应该是没有问题的。 柱子不能反冲是因为早期的色谱柱设计问题，担心柱尾端的颗粒被冲进柱子中，现在的柱子前后都有滤网，所以尽情反冲吧。
还有，安捷伦的工程师都说可以，你还犹豫什么？不相信全球最好的色谱售后维护了吗一个很幼稚但困扰了我很久的问题和以前的y有什么区别么?譬如f(x)=x^2+x和y=x^2+x有区别么?然后如果是f(x+1)和f(x)又有什么区别呢 括号里面的东西影响后面的关系式么?譬如f(x)=x^2+x那f(x+1)是不是_百度作业帮
一个很幼稚但困扰了我很久的问题和以前的y有什么区别么?譬如f(x)=x^2+x和y=x^2+x有区别么?然后如果是f(x+1)和f(x)又有什么区别呢 括号里面的东西影响后面的关系式么?譬如f(x)=x^2+x那f(x+1)是不是
一个很幼稚但困扰了我很久的问题和以前的y有什么区别么?譬如f(x)=x^2+x和y=x^2+x有区别么?然后如果是f(x+1)和f(x)又有什么区别呢 括号里面的东西影响后面的关系式么?譬如f(x)=x^2+x那f(x+1)是不是要等于(x+1)^2+(x+1)求高人解答啊 困扰我好久了
您好,很高兴为您解答疑难~f(x)=x^2+x和y=x^2+x是没有区别的,f（x）指定了,这个函数的自变量是x,如y=kx+b中,有三个参数,就很难解决哪个是自变量,以此区分.f(x)=x^2+x那f(x+1)是不是要等于(x+1)^2+(x+1)是的.括号里的是自变量,所以应该用整体来作为自变量,所以应该是f(x+1)等于(x+1)^2+(x+1)很高兴为您解答疑难@!`有问题请追问.
那两个括号里面的两个自变量的定义域是不是一样的啊？如果f(x)的定义域是（1,3）就是说自变量x的定义域是（1,3），那f(x+1)的自变量x的定义域是不是就要是(0,2)了呢？x+1整体是自变量，但只能x变化吧？
定义域是一样的
所以后面的X定义域要减1
这其实很好理解，首先y=f(x)是一个函数，你所说的f(x)=x^2+x就是一个函数关系，它的用途就是解释自变量和因变量的之间的代数关系或者其他关系的，自变量如何对因变量产生作用全都依靠这个关系来联系的。所以出题的时候你只会看到函数y=f(x)或者y=x^2+x，而不会看到函数f(x)=x^2+x，因为这只是一个关系式，做题的时候根据这个关系式得出y。你所说的f(x+1)和f(x)，区别...
定义域肯定不一样，但是你给的那个是一样的，因为f(x+1)中x+1的定义域和f(x)中x的定义域才是一样的。你给的题目中，f(x)中x的定义域是负无穷到正无穷，那么f(x+1)中x+1的定义域也是负无穷到正无穷，只不过计算出来就是f(x+1)中x的定义域是负无穷到正无穷。
假如换一道题，你的f(x)中x的定义域是1到3，那么f(x+1)中x+1的定义域就是1到3，算出来x的定义域就会是0到2.共有 2513 人关注过本帖
标题：一个困扰我很久的问题（WM_CREATE）?
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一个困扰我很久的问题（WM_CREATE）?
网上是这样解释的：当一个应用程序创建窗口时，会通过消息处理函数。但是这个消息在 CreateWindow 函数返回之前被送到消息处理函数。
&&首先问题是这样引出来的，在CreateWindow函数没返回之前，CreateWindow函数发送一个WM_CREATE消息，那这个WM_CREATE消息就到窗口过程中的WM_CREATE执行。但问题来了,WM_CREATE消息来得时候窗口还没建立好呢？到底windows系统什么时候给 应用程序 准备 消息队列的，不是窗口弹出来的时候才给应用程序准备 消息队列的吗？还有就是CreateWindow还没有返回时就可以在其他地方用hwnd？&&尽量详细一点
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首先，你得认识到CreateWindow是一个函数，它一旦执行起来，就不是一个时间点，而是一个时间段，尽管时间很短。
那么我们说它执行以后窗口就建立起来了，并不是说它返回之前窗口就没有建立起来。很显然是在它执行的过程中的某个时刻，窗口已经建立，消息队列已经建立，然后再发送一个WM_CREATE给队列，最后再返回的。
另外，窗口建立起来了和它出现在显示器上可不是一回事儿，所以肯定是有了消息队列之后窗口才会被ShowWindow弄到屏幕上去。
最后，hwnd的值肯定在CreateWindow在执行的早期就已经形成了，所以在CreateWindow没返回之前系统就把这个值传递给窗口过程也不意外。
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我背一段给你听：
当启动windows程序的时候，windows系统就为之建立好了消息队列。
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以下是引用do8do8do8在 14:42:11的发言：
i like this.
我背一段给你听：
当启动windows程序的时候，windows系统就为之建立好了消息队列。&&&窗口过程函数在窗口被建立后和在窗口可见之前接受了WM_CREATE
&&&hwnd句柄的存在跟返回值有先后之分，建立了hwnd句柄在先，返回句柄在后，
&&&但是句柄的使用，在hwnd句柄建立后就可以了。
．五星红旗随风飘扬，胜利歌声多么响亮;歌唱我们亲爱的祖国,．．
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以下是引用forever74在 14:27:55的发言：
首先，你得认识到CreateWindow是一个函数，它一旦执行起来，就不是一个时间点，而是一个时间段，尽管时间很短。
那么我们说它执行以后窗口就建立起来了，并不是说它返回之前窗口就没有建立起来。很显然是在它执行的过程中的某个时刻，窗口已经建立，消息队列已经建立，然后再发送一个WM_CREATE给队列，最后再返回的。
另外，窗口建立起来了和它出现在显示器上可不是一回事儿，所以肯定是有了消息队列之后窗口才会被ShowWindow弄到屏幕上去。
最后，hwnd的值肯定在CreateWindow在执行的早期就已经形成了，所以在CreateWindow没返回之前系统就把这个值传递给窗口过程也不意外。这楼说的不错啊，我的内容基本上和他重复了，真不该来抢分
．五星红旗随风飘扬，胜利歌声多么响亮;歌唱我们亲爱的祖国,．．
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基本流程是这样的
GetModuleHandle-RtlZeroMemory-LoadCursor-RegisterClassEx-CreateWindowEx-
ShowWindow-UpdateWindow
其中CreateWindowEx是CreateWindow的32位扩展，用法相同 多了风格参数。
要理解窗口的建立并不是以CreateWindow或CreateWindowEx为开始的，在之前
还有不少步骤。建立并显示以后 ，还有消息循环等。
另外还要区别实例句柄hInstance和窗口句柄hWnd。因为一般都是以窗口来表示一个程序，所以很多时候就把hInstance和hWnd混淆了。实际是不同的。GetModuleHandle首先获取hInstance，CreateWindowEx完成以后，才有hWnd。
windows系统有系统消息队列，还给每个进程的每个线程维护一个消息队列。
windowS就是消息驱动的系统，理解消息还是很重要的。如果有兴趣 可以看看
那本经典的windows程序设计。
小妹，哥哥看你骨骼清奇，绝非凡人，将来必成大业，不如这样，你先把裤裤脱了，待哥哥为你开启灵窍，然后我们一起努力钻研如何
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