关于限制性内切酶保护碱基. 在基因工程中,限制性内切酶保护碱基主要用于： A.目的基因的提取和导入 B.目的基因的

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-01-22 05:00 标签： 限制性内切酶保护碱基
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＞＞＞下列有关基因工程操作的叙述正确的是[]A．用同种限制性内切酶切割..
下列有关基因工程操作的叙述正确的是
A．用同种限制性内切酶切割运载体与目的基因可获得相同黏性末端B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C．检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D．用含抗生素抗性基因的质粒作为运载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
题型：单选题难度：中档来源：北京期末题
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据魔方格专家权威分析，试题“下列有关基因工程操作的叙述正确的是[]A．用同种限制性内切酶切割..”主要考查你对&&基因工程的基本操作程序&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序：1、目的基因的获取（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。2、基因表达载体的构建（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图：①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。（3）基因表达载体的构建过程：3、将目的基因导入受体细胞（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（2）常用的转化方法：
（3）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4、目的基因的检测和表达（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。 （4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。知识点拨：1、构建基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。 2、PCR技术：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基冈的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。目的：通过指数式扩增获取大量的目的基因。 3、基因文库中不是直接保管相应基因，基因文库中的基因保存在受体菌中。 4、在基因工程的四个操作步骤中，只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。5、原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，有利于目的基因的复制与表达，因此常用大肠杆菌等原核生物作为受俸细胞。 6、植物细胞的全能性较高，可经植物组织培养过程成为完整植物体，因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞；动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。7、转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中，从而使受体生物获得了新的遗传特性的现象，从其变化的实质看，这种变异属于可遗传变异中的基因重组。 知识拓展：1、基因文库的构建：（1）概念①基因组文库：含有一种生物的全部基因。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因组文库。 ②cDNA文库：只包含了一种生物的部分基因。 （2）构建过程
2、人工合成目的基因（1）反转录法：（2）人工合成目的基因3、PCR技术扩增目的基因①原理：DNA双链复制②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
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9041381520100923931938325486691知识点梳理
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术． 这种技术是在体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物．通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状．
多聚酶链式反应（PCR)多聚酶链式反应（PCR）：一种体外扩增DNA的方法。PCR用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段，即通过引物延伸而进行的重复双向DNA合成。基本原理及过程如下：　　PCR循环过程中有三种不同的事件发生：（1）模板变性；（2）引物退火；（3）热稳定DNA聚合酶进行DNA合成。　　1． 变性：加热使模板DNA在高温下（94-95℃）变性，双链间的氢键断裂而形成两条单链，即变性阶段。　　2． 退火：在体系降至37-65℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合，使引物与模板链3’端结合，形成部分双链DNA，即退火阶段。　　3． 延伸：体系反应温度升至中温72℃，耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸（dNTP），按5’到3’方向复制出互补DNA，即引物的延伸阶段。　
1、获取目的基因是实施基因工程的第一步。2、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。3、将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。4、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
整理教师:&&
举一反三（巩固练习，成绩显著提升，去）
根据问他()知识点分析，
试题“(选做题)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：&...”，相似的试题还有：
(选做题)基因工程又叫基因拼接技术。请回答下列问题：(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的()为模板，()成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成()。(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、()。(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性核酸内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有()种环状DNA分子，它们分别是()、()、()环状DNA分子。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：&(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有_______和______。(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_________。(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和_____DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。(5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_____________。
下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割抗虫基因。请画出质粒被限制性内切酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端：______________。①过程所需工具酶还有__________，该酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？___________。(2)通过①过程中得到的重组质粒就是基因表达载体，它除了图中所体现的组成外，还必须有的组成是______________等。构建基因表达载体是基因工程的核心，其目的是：使目的基因在受体细胞中___________、_____________。(3)将通过②程得到的农杆菌涂布在含有________的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。(4)农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞后，目的基因的最终位置是受体细胞染色体DNA上，是否得到符合要求的受体细胞，检测所采用的方法是：_____________。经筛选分析，该植株细胞中的一条染色体上含有一个携带抗虫基因的DNA片段。理论上，该转基因植株与普通普通棉杂交所获F1中，仍具有抗虫特性的植株占总数的________。科学家们预言，即使是纯种”，独立种植若干代以后植株的抗虫能力也将下降。请简要分析可能原因：_______________、_______________。使用次数：0
入库时间：None
有关基因工程的叙述正确的是
A．限制性内切酶只在获得目的基因时才用
B．重组质粒的形成在细胞内完成
C．质粒都可作运载体&&&&&&&&&&&&&&&&&&
D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
D <初中Net化学czhx.cooco.net.cnc
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备课中心教案课件试卷下载在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于
A．目的基因的提取和导入B．目的基因的导入和_百度知道
在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于
A．目的基因的提取和导入B．目的基因的导入和
在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于
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