用oligo7怎么输入引物设计的pcr引物多少分以上可用

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-05-15 09:47 标签： oligo7设计引物
用oligo软件设计引物时出现two-temperature pcr recommended:(68°/94°)什么意低盐高盐怎么区分？
一楼不要乱答.如果是低盐和高盐,那么每对引物都会有两个温度,但软件为何只有部分引物会有此提示?另外,你见过68度变性或者94度退火的么?two-temperature PCR为“两步法PCR”,是指将退火和延伸合并为一步,68/94的意思是在94°变性,退火和延伸都在68°,然后循环.我估计lz的引物可能设计的比较长,于是退火温度比较高.
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一个是在低盐条件下的,一个是在高盐条件下的低盐一般是0.05M Na离子,高盐一般是1M Na离子,我们所以的PCR缓冲液,一般是低盐的.
乘龙_Lapras - 回答正确，还有就是你的引物GC含量比较高导致退火温度高而退火温度高一般退火和延伸就合为一步了。68/95是经典的两步法扩增温度 递延高盐不用管它。一般你pcr不会用到哪个参数
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