为什么ao/eb染色荧光激发和发射波长显微镜下激发光

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【求助】AO/EB染色方法
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这个帖子发布于6年零335天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
求AO/EB染色方法的具体步骤。谢谢!最好具体点,专业点。
不知道邀请谁?试试他们
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AO/EB染料: 精确称取AO(吖啶橙)、EB各1mg,分别溶于10ml pH7.2 PBS中使之配成100μg/ml的储备液,用前等量混合,备用。
AO/EB染色及观察结果:取已经培养好并加样孵育后的预观察细胞悬液 100μl,加入AO/EB染料4μl混匀,置1滴于载玻片,上覆盖玻片,荧光显微镜下观察结果并计数200个细胞统计结果。
凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。凋亡比例=(VA+NVA)/(VN+VA+NVA+NVN)*100%
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wqrainsun edited on
谢谢指导!
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