紫外最大吸收波长是650nm的话，荧光红色荧光蛋白激发波长长该选什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-05-23 04:43 标签： 荧光显微镜激发波长
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激发波长６３５ｎｍ，发射波长６５０ｎｍ，想把它应用于荧光成像，哪里可以做呢？
如题，激发波长６３５ｎｍ，发射波长６５０ｎｍ的纳米粒子，想把它应用于荧光成像，哪里可以做呢？
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【讨论】请问 荧光光谱 怎么确定激发波长？
用的仪器 型号 是 RF----,数字记不清了。
在百度上搜了一下，答案如下：
（1） 如果你的仪器有三维扫描功能，那就非常简单了，按照说明书要求去做就可以了。
（2） 如果仪器没有上述功能，一般可将仪器的激发波长(EX)先设定为200nm，然后进行发射波长(EM)模式扫描，(EM)波长范围暂设定为 210－800nm，然后记录所有出现的峰值波长；改变激发波长(EX)后再扫描，如第二次发射图谱中的某个（或某些）峰的位置没有位移（或位移很少），一般来说这个（或这些）峰就是荧光峰；因为荧光峰的位置是不随激发波长的改变而改变的，仅是峰高（或峰面积）发生改变
（3） 将确定的荧光峰的波长作为发射波长(EM)固定下来，再做激发波长(EX)的扫描，激发波长的范围要小于发射波长（根据斯拖克斯定律）；如果仅出一个峰则很简单确立下来，再将这个波长固定下来重新做真正的发射波长(EM)扫描，可以得到良好的信噪比的结果值；如果做激发波长(EX)扫描后出现几个峰，则需要有经验的选择了，一般选择峰形高度适合并又有一定带宽的峰为激发波长。如果固定发射找到多个激发的话,也可以参考荧光光谱的特性----激发和发射呈镜象的特点来确定激发波长.
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随时随地聊科研紫外最大吸收波长是650nm的话,荧光激发波长该选什么?如果激发波长选了650nm,那根据斯托克斯定理,发射波长不是在可见光外面了?
按照以下步骤找到最合适的荧光激发波长：最大吸收是650nm的话,先做发射光谱选激发光就先用650nm试一下,然后找到最大发射峰波长,比如说是EMmax；然后把光谱切换到激发光谱,用EMmax作为发射波长,测激发光谱.在激发光谱上找到最大激发波长,比如是EXmax.这个EXmax就是你的最好的激发波长,再做荧光发射光谱时,就可以选择它作为激发波长了.最大吸收波长与最大激发波长一般情况下是不太一样的.激发波长选650nm,如果你的待测物是符合斯托克斯规则的,那发射波长肯定大于650nm,可能是可见光,可能是红外光,具体要看斯托克斯位移是多大.不过一般的荧光光谱都能测到900nm没问题,所以测这个应该是可以的.如果是符合反斯托克斯规则的,也就是上转换发光材料（一般见于稀土发光材料）,那发射波长有可能小于650nm.
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