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高温胁迫下外源褪黑素对黄瓜幼苗活性氧代谢的影响 33 3温胁迫下黄瓜叶片超氧阴离子自由基 (O2? )产生速率、过氧化氢 ( H2 O2 )含量、解质漏渗率电h pera stress. Xiang dong, Yan, SUN ZHANG ian, GUO Xiao2qinCollege Horticu N orthw cucum ber (Cucum is sativus) ; hig active oxygen me2抗氧化剂的含量 ,增加抗氧化酶的表达.现已夏秋茬露地和设施栽培中 ,高温往往成为影响黄瓜N2乙酰基 252甲氧基色胺 ) ,是色氨酸的吲哚衍生物 ,衰弱、增强免疫力等,现已被广泛应用于药 (保3国家大学生创新性实验计划项目 ( G200707)资助.健 )品中. 1993年发现高等植物中也存在褪黑素,3 3通讯作者. E2mail: sunyanma64@ sina. com收稿 , 接受 .为过应用生态学报 2010年 5月 第 21卷 第 5期 Chinese Journal of App lied Ecology, M ay 2010, 21 ( 5) : 1295 - 1300高温胁迫下外源褪黑素对黄瓜幼苗高温胁迫下外源褪黑素对黄瓜幼苗 活性氧代谢的影响活性氧代谢的影响徐向东 孙 艳 孙 波 张 坚 郭晓芹(西北农林科技大学园艺学院 ,陕西杨凌 712100)摘摘 要要 以黄瓜品种‘津春 4号’试材 ,用叶面喷施的方法 ,研究了高温胁迫条件下外源褪 黑素 (m elatonin,M T)对黄瓜幼苗活性氧 ( ROS)代谢的影响.结果表明 :外源 M T能显著降低高-( relative electric conductivity, REC)及丙二醛 (MDA )含量 ,增强黄瓜幼苗叶片中超氧化物歧化 酶 ( SOD )、氧化氢酶 ( CAT)、过氧化物酶 ( POD )活性 ,提高抗坏血酸 ( A sA )、谷胱甘肽 ( GSH )及可溶性蛋白质含量.说明 M T预处理能抑制高温胁迫条件下黄瓜幼苗体内 ROS的产 生 ,提高抗氧化酶系的活性及抗氧化物质的含量 ,降低膜质过氧化水平 ,保护脂膜的完整性 , 减少电解质的外渗 ,减轻高温胁迫对幼苗造成的伤害 ,提高幼苗抗高温胁迫的能力. 关键词关键词 褪黑素 黄瓜 高温胁迫 活性氧代谢文章编号文章编号 1001 - 9332 ( 2010) 05 - 1295 - 06 中图分类号中图分类号 Q948. 1; R961 文献标识码文献标识码 AEffects of exogenous m ela ton in on active oxygen m etabolism of cucum ber seedlings underJ. A ppl. Ecol. , 2010, 21 ( 5) : 1295 - 1300.ied the effects of foliar app lication of exogenous m elatonin (M T) on the active oxygen metabolism of the seedlings under high temperature stress. Under the stress, the exogenousM T could significantly-crease the activities of superoxide radical ( SOD ) , peroxidase ( POD ) , and catalase ( CAT) , and the contents of ascorbic acid (A sA ) , glutathione ( GSH ) , and soluble p roteins, illustrating thatoxidative enzyme activities and antioxidant contents, and decrease the membrane lip id peroxidationage of high temperature stress to the seedlings.tabolism.黄瓜 (Cucum is sativus)是我国消费量较大的蔬 1958年被发现存在于牛松果体中 ,之后的大量研究 菜之一 ,它起源于热带 ,生长发育过程中喜温 ,但不发现 M T具有很强的抗自由基作用 ,能减少?OH和耐高温 ,越夏生产比较困难.在南方露地栽培及北方过氧阴离子含量 ,提高动物体内抗氧化酶 mRNA和[1 - 3]植株正常生长的环境因子.褪黑素 (melatonin, M T,研究证实 ,M T对动物和人体具有明显的延缓衰老 作用 ,能减缓生物钟紊乱、改善睡眠障碍、治疗神经[3][4]特别是一些药用植物和食用植物的花和种子中含量1296应 用 生 态 学 报 21卷相对较高[ 1 - 2, 5 - 7 ].虽然 M T在植物体中的研究少于含量用林植芳等[ 11 ]的方法测定. SOD活性用 NB T 动物及人体 ,但仍然取得了一些研究成果.研究表明 ,M T可调节植物形态建成 ,促进金丝桃愈伤组织光还原法测定 , POD活性用愈创木酚法测定 , CAT活性用紫外吸收法测定 ,MDA含量用硫代巴比妥酸 根的发育[8];还能调节羽扇豆的生长 ,作用类似于法测定 ,可溶性蛋白质含量参照高俊凤等[ 12 ]的方法吲哚乙酸 ( IAA ) [ 8 ] . Tan等 [ 1 ]发现 ,把芦荟从 25℃[9]报道 ,西红柿在成熟过程中 ,呼吸作用加强 ,过氧化 物及自由基含量升高 ,并伴随着 M T表达水平的明显提高.低温条件下芦荟和西红柿成熟过程中对M T的反应均与自由基的产生及清除有关 ,而 M T在植物抗氧化代谢中的作用还缺乏系统研究.本试验以黄瓜幼苗为试材 ,采用叶片喷布外源 M T的方法 , 测定了高温胁迫前后叶片中的自由基产生速率及保护酶活性的变化等相关指标 ,以期探讨 M T在植物抗氧化代谢中的作用 ,揭示 M T在植物抵御高温逆境方面的生理作用机制 ,为 M T的外用提供理论依据和参考.1 材料与方法材料与方法试验于 2008年 8—10月在西北农林科技大学 园艺学院进行.供试黄瓜品种为‘津春 4号’,催芽后播种在装有蔬菜专用基质 (购于西北农林科技大学新天地设施农业开发有限公司 )的营养钵 ( 10 cm×10 cm )中 ,萌发后置于 RXZ智能型人工气候箱(宁波江南仪器厂制造 )中培养 ,培养条件为 :光周期 14 h (昼 ) /10 h (夜 )、夜温度 ( 28± )℃ / ( 17- 2 - 170% ,待子叶展平后隔天用 1 /2 Hoagland营养液浇 灌 ,每钵用量为 20 m l.通过前期预备试验 ,筛选并确定出效果比较明 显的 M T浓度梯度 ,当黄瓜幼苗长到三叶一心时 ,选择整齐一致的壮苗用 0 ( CK)、25、50、100、150μmol- 1次 ,以叶片滴水为度 ,共喷 3次.每个处理 40钵 ,每 钵种植 1株.最后一次喷施 M T后 2 d,将幼苗置于相对湿度 75%、度为 ( 40± )℃的光照培养箱中进行高温胁迫处理.处理 0、3、6、9、12和 24 h时采集第 2和第 3片叶 ,一部分样品测定相对电导率 ,另一部分样品则用液氮速冻 ,保存在超低温冰箱 ( -70℃)中 ,用于测定各生理指标.-膜相对透性 = (叶片煮沸前外渗液电导值 /叶片煮 沸后外渗液电导值 )×100%.还原型抗坏血酸(A sA )和还原型谷胱甘肽 ( GSH )含量用 M a和[ 13 ]平均值作为各处理的实测值.所得数据采用 Excel和 SAS / W in (V8 )统计软件进行单因素方差分析和相关分析 ,并用邓肯氏新复极差法 (Duncan’s new m ultip le range test)进行2 结果与分析结果与分析-生速率和 H2 O2含量的影响 从图 1可以看出 ,在黄瓜幼苗经历高温胁迫的---H2 O2含量的影响-and H2 O2 content in leaves of cucumber seedlings under highletters in the same tim e meant significant difference among treatm ents at条件下移到 4℃时 ,体内 M T含量增加 ;张贵友等111 供试材料及幼苗培养±1)℃、照强度 100μmol?m光? s、相对湿度112 试验设计?L外源 M T于 19: 00喷布黄瓜叶片 ,隔 2 d喷 1113 测定项目与方法O2?产生速率用李忠光等[ 10 ]的方法测定. H2 O2测定.细胞膜透性用 DDS2307型电导仪测定 ,细胞的方法测定.上述指标均重复测定 3次 ,以Cheng114 数据处理差异显著性检验.采用 SigmaPlot 1010软件作图.211 高温胁迫下外源 M T对黄瓜幼苗叶片 O2?产不同时间内 ,不同浓度 M T对 O2?产生速率的影响均表现出了相同的趋势 ,即 O2?产生速率随 M T浓度的增加而显著 ( P < 0105 )降低 ,当浓度达到图图 1 高温胁迫下外源 M T对黄瓜幼苗叶片 O2?产生速率和F ig. 1 Effects of exogenous melatonin on O2? p roduction ratetemperature同stress字母表示处理间差异显著 ( P < 0105 ) D ifferent昼 / 1温 10105 level.下同 The same below.50μmol?L时 , O2?产生速率降到最低.高温胁迫- 13、6、9、12和 24 h后 , 50μmol?L?- 1M T使 O2产生速率分别比之后照减小 14T8%度30%、31增2%、2717%生速率虽有增加但还是显著 ( P < 0105 )低于对照.这表明 25～150μmol?LM T可有效抑制 O2?产- 1生速率.随着胁迫时间的延长 , O2?产生速率逐渐增外源 M T对 H2 O2含量的影响表现出与 O2?产浓度为 100μmol?L,并随时间的延长 , H2 O2含量212 高温胁迫下外源 M T对黄瓜幼苗叶片 MDA含MDA含量的变化趋势与 O2?产生速率相同.在 M T显著 ( P < 0105)降低 ,当浓度达到 50μmol?L时 ,L .两者达到最小值后又随 M T浓度的增大而增F ig. 2 Effects of exogenous melatonin on MDA content and rel2MDA含量之间呈极显著 ( P < 0101 )的正相关关系 ,相关系数 r = 呈显著 ( P < 0105 )的正相关关系 ,相关系数 r =01843 ( n = 6, df = 4, r0105 = 01811, r0101 = 01917 ) ,3213 高温胁迫下外源 M T对黄瓜幼苗叶片 SOD、0105)升高 ,当浓度达到 50μmol?L时 SOD和?LM T使 SOD和 POD活性分别比对照增加POD活性有所下0%.,但仍然显著继续增1大 ) SOD和浓度为 100μmol?L,且在整个胁迫过程中 CAT从上述分析可知 , 25～150μmol?LM T均可POD和 CAT 3种保护酶的活性. SOD是清除 O2?的是清除 H2 O2的专一酶类. SOD与 O2?产生速率之间呈显著 ( P < 0105 )的负相关关系 ,相关系数 r =- 01869 ; CAT与
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杨桃成花的形态学与碳水化合物的研究
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摘要:本文以6年生盆栽 B‘10'甜杨桃为材料，观察了新梢上各节位芽的分化情
况，并比较了新梢上不同节位的碳水化合物含量;研究了水分胁迫对杨桃成花与碳水
化合物的影响;以8年生马来西亚大果甜杨桃为材料，探讨了田间杨桃碳水化合物的
动态关系，以及修剪对杨桃成花的效应。本试验的具体研究结果如下:
1.杨桃花序的发育是按照由基部到顶部的顺序进行的，末级花序枝顶端花先开，
花的发育是按曹片，花瓣一雄蕊，雌蕊的分化过程进行的;当第2节位开始露“红”
(肉眼可辨红色的花芽)时，新梢上除了顶芽以外的各节位上的芽基本上进入形态分
化阶段。第3和第4节位露“红”的枝条，韧皮部和木质部可溶性搪含量比第1位和第
2位 “露红”的枝条高。徒长枝第1节位的可溶性糖和淀粉含量都很高，第3、第5节
位的含量也与第1或第2节位“露红”的成花枝上相应节位的含量相当。本研究结果表
明，杨桃新梢上的芽在进行形态分化的过程中，枝条仍在积累碳水化合物.
2.水分胁迫下杨桃叶片相对电导率增加，相对含水量减少;与正常浇水相比，
控水处理使杨桃新梢分化花芽的数量增多，抽梢当年不能成花的徒长枝基部现蕾成
花。但在新梢和徒长枝上分化出较多的混合花芽;控水处理使杨桃的叶片、新梢、一
年生枝的可溶性搪的含量明显升高，在花芽 露“红”时期，叶片新梢和一年生枝的可溶
性糖的含量升高的幅度最大;在控水处理过程中，叶片、新梢木质部、一年生枝木质
部淀粉含量高于正常浇水植株，在新梢“露红”时期三者的淀粉含量却降低至较低水
平，复水后都急剧升至最大值;与正常浇水相比，控水处理使徒长枝蔗搪与淀粉的含
3.在试验当年的第一次成花期，田间杨桃粗枝 (直径 2t0.2cm)与细枝 (直径
1t0.lcm)相比，粗枝的现蕾率和平均花量较大;二者的可溶性总糖、果糖、蔗糖含
量，在2次现蕾期和2次的果实发育期，分别形成2峰2谷的趋势，其中的蔗糖含量，
粗枝木质部明显高于韧皮部;细枝葡萄糖含量明显大于粗枝，且呈现2峰2谷的趋势，
粗枝含量趋势则不明显;粗枝韧皮部淀粉含量明显高于其木质部和细枝木质部，细枝
韧皮部含量较低且变化趋势不明显，粗枝 (韧皮部、木质部)和细枝木质部在2次现
蕾期和2次果实发育期，呈现出2谷2峰的趋势，这与可溶性糖的变化趋势相反;
4.3月底修剪处理使田间杨桃早成花2周左右，且粗枝 (直径2t0.2cm)的成花
率和平均花量均高于未修剪树。
本文研究结果表明:杨桃花芽的“露红”可以作为杨桃花芽分化过程中花发端的标
志.杨桃花序为有限花序，花的发育是按照由内到外的顺序进行的;适当的水分胁迫
可以促进杨桃花芽分化;杨桃成花新梢上的碳水化合物并未积累到最高即进入形态分
化，高水平的碳水化合物有利于杨桃新梢的花芽分化;成花前较高水平的淀粉含量，
以及成花期间较高水平的可溶性糖含量，对杨桃较老熟的成花枝的成花是有利的。
关键词:杨桃 花芽分化 碳水化合物
MorphologicalDifferentiationofFlowerBudandCarbohydrate
StudiesinAverrhoaCarambola
WuPingping
(Collegeof Horticulture,SouthChinaAgriculturalUniversiyt,Guangzhou
510642,China)
Abstract:Histologicaldifferentiationofflowerbudsindifferentnodesofnewshootsin6
yearoldpotted'B10'Averrhoacarambolawasstudied.Alsocarbohydratecontentsinthese
nodeswereassayed.Flowerformationandcarbohydratecontentsinpottedtreesunder
waterstresswereassayed.ChangesofCarbohydratecontentsindifferentbranchesandthe
effectsofpruningonfloweringwerestudied.Theresultswereasfollows:
1.Thesequenc
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&新手一枚，想测下植物各项生理指标，能先用液氮保存叶片么
新手一枚，想测下植物各项生理指标，能先用液氮保存叶片么
作者 seamo927
新手一枚，想测下植物各项生理指标，能先用液氮保存叶片么
先用液氮速冻&&在放入超低温冰箱（-80℃）保存就可以了~
可以先用液氮保存鲜样，不过如果你实验室离试验地比较近的话，用干冰或者化学冰袋也可以保存待会做实验。
叶绿素没了···
引用回帖:: Originally posted by 可好 at
先用液氮速冻&&在放入超低温冰箱（-80℃）保存就可以了~ 那在提取的时候可以有液氮研磨，对其结果影响大吗，
这要看你想测什么生理指标了，液氮零下两百度，速冻之后叶片变脆甚至变碎，如果是要测酶活性之类的就无所谓了，如果需要完整叶片的就不行了
可以先用液氨迅速冷冻，之后保存在-40摄氏度下，冰冻条件下，对可溶性蛋白、可溶性糖、酶等指标影响不大。
测酶活可以用液氮暂时保存新鲜叶片。。。
24小时热帖
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与700万科研达人随时交流植物叶片电导率仪使用 - 实验交流 - 生物秀
标题: 植物叶片电导率仪使用
摘要: [植物叶片电导率仪使用] 亲们，我现在需要测定植物叶片的电导率，但是不会使用电导率仪，特别是有关电极什么的，我之前测定电导率都是直接把叶片洗干净后浸入水中4h，之后用蒸馏水调零后测定浸有叶片的电导率值，然后再煮沸后再测定，但是我没有使用到校正液和选择电极棒，我的测定方法好像是错的，请各位高手帮帮我吧，主要是怎么使用电导率仪进 关键词:[电导率 叶片 电导率仪 校准 电极 一年生 校正]……
亲们，我现在需要测定植物叶片的电导率，但是不会使用电导率仪，特别是有关电极什么的，我之前测定电导率都是直接把叶片洗干净后浸入水中4h，之后用蒸馏水调零后测定浸有叶片的电导率值，然后再煮沸后再测定，但是我没有使用到校正液和选择电极棒，我的测定方法好像是错的，请各位高手帮帮我吧，主要是怎么使用电导率仪进行植物叶片电导的测定步骤！！急呀~~先行谢过了！回复直接看说明书或者在度娘里面找说明书看回复测定相对电导率其实也没必要校准回复相对电导率要的不就是初始电导率和煮沸电导率比值吗？我测过几次，量也挺多的，也没校准过，结果还挺好的。回复
相对电导率要的不就是初始电导率和煮沸电导率比值吗？我测过几次，量也挺多的，也没校准过，结果还挺好的。... 好吧~~可能是我实验方法有误，我测出来就有点不对呢~回复常温下，一年生的枝条相对电导率达到50%代表什么
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