荧光定量标准曲线步骤曲线怎么分析

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-09-05 13:42 标签： 荧光定量溶解曲线
一般做实时荧光定量PCR的数据分析都采用相对定量方法，我想做绝对定量PCR，请问高人能否详细解读关于绝对定量PCR的数据分析过程，越详细越好！非常感谢
全部答案（共1个回答）
R 实验数据的方法是绝对定量和相对定量。绝对定量通过标准曲线计算起始模板的拷贝数；相对定量方法则是比较经过处理的样品和未经处理的样品目标转录本之间的表达差异。2－△△CT方法是实时定量PCR 实验中分析基因表达相对变化的一种简便方法，即相对定量的一种简便方法。本文介绍了该方法的推导，假设及其应用。另外，在本文中我们还介绍了两种2－△△CT衍生方法的推导和应用，它们在实时定量 PCR 数据分析中可能会被用到。
希望对您有所帮助
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谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用?
血刺卡卡丶3bJh
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用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一.反应结束后,逐渐加温.和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和Syber Green结合.一般每加温一度,读一次信号.当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多.曲线的横坐标是温度,而纵坐标是荧光信号的变化!开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的,接近Tm时,突然变化加大,所以出现峰值.再升温,产物全部解离,就又是一条直线了.如果有非特异性产物,在加热过程中就会出现一些比较矮,宽的峰.
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