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　　摘要： 目的：探讨类风湿因子联合抗SSA抗体、抗SSB抗体联合检测在原发性干燥症诊　
　　中的意义。方法：选取本院年门诊及住院的原发性干燥症（PSS）患者85　例140例健康成人对照组采用免疫印迹法检测抗SSA、抗SSB抗体类风湿因子采用速率散射比浊发定量检测。
　　结果： 抗SSA抗体、抗SSB抗体、类风湿因子在原发性干燥症患者中的阳性率分别为：
　　６８％，３７％，４７％，均显著高于健康体检者。SSA、SSB、类风湿因子三者联合检测可显著提高原发性干燥症患者的检出率，检测阳性率高达：８５％。结论： 类风湿因子（ＲＦ）联合ＳＳＡ、ＳＳＢ对原发性干燥症的早期诊断具有重要作用。
　　关键词：原发性干燥综合症；干燥综合征A； 干燥综合征B抗体； 类风湿因子；&&&&&&&&
　　联合检测
　　原发性干燥症一种跟遗传相关的有一定家族史的自身免疫性疾病，典型的临床表现为腺体分泌不足的导致的口、眼干燥，并可累及到多个消化系统如肾、肺、神经、等，进而引起全身的器官受累。常见表现有全身酸痛、肌肉无力、胸闷、癫痫、干咳、软瘫、以及原因不明的肝炎、肝硬化、慢性腹泻等[1]。但其发病机制尚不明确，现在仍无公认的的血清学诊断标准。原发性干燥综合症患者在血清中可检测出多种自身抗体。根据以往的研究发现：45.7%的患者可有抗核抗体滴度的升高，70%左右的患者有抗SSA阳性，40%左右患者有抗SSB阳性，50%左右患者可有类风湿因子的升高[2]。本研究主要探讨三者联合检测对提高原发性干燥症的检出率的意义，提高早期诊断水平.
　　1. 材料和方法：
　　1.1一般材料：标本来源：静脉血采自年本院的门诊及住院已确诊的原发性干燥症患者85例，其中男8例，女77例；年龄18-80岁，中位年龄64.3岁。以上病例均符合2003年国家关于原发性干燥症的诊断标准[3]。同时选取同期本院健康体检对照组140例血清进行对比。
　　1.2. 检测方法：抗SSA抗体，抗SSB抗体检测：使用德国Human试剂盒，采用线性免疫印迹法。具体步骤如下：采集患者晨起静脉血5ml，室温条件下加10&l血清于1ml样品稀释液中，摇床上摇摆30min，洗涤：每次5分钟，洗3次。然后加入酶标记二抗室温摇床上摇摆30min后重复上次洗涤步骤，加显色剂室温摇床摇摆10min后倒去槽内最后加终止液试验结束。结果与条带上的阳性及弱阳性质控线进行比较进行判断。类风湿因子采用速率散射比浊法在日立7600生化分析仪上定量测定，使用试剂盒为上海科华公司生产。严格按照仪器操作流程和试剂盒说明书进行定标，保证试验结果的可靠性。
　　统计学方法
　　采用SPSS17.0统计软件进行分析，定性结果百分率以百分数表示，组间比较采用卡方检验。P&0.05为差异有统计学意义。
　　结论：本实验证实单独检测SSA、SSB抗体的检出率分别是68%、37%。两项联合检测时阳性率可有很大提高能达到74%。联合类风湿因子、SSA、SSB三项一起检测阳性率可达85%,对提高原发性干燥综合征的早期诊断具有重大意义。具体实验数据见下表
　　3. 讨论：
　　原发性干燥症是一种影响内外分泌腺的自身免疫性疾病。主要侵犯泪腺和唾液腺，以眼和口腔的干燥为主要症状。患者唾液腺中有小淋巴细胞浸润灶和较大的浸润灶，前者主要由B细胞与浆细胞组成，而后者主要位于中央的T细胞组成，其中以CD4+细胞浸润为主，同时有少量的CD8+细胞，B细胞和浆细胞分布在周边区，根据现有研究结果显示，其组织损伤机理可能是依赖细胞介导的淋巴细胞毒反应，但是也有人认为本病的发生与位于HLA-D微店的免疫反应基因有关，近年来有人通过临床研究得出，所有干燥症患者的纤体的上皮细胞都有HLA-DR抗原的表达，表达的程度与浸润淋巴细胞量成正比[4]。此病发于绝经期以后或30-40岁的女性，发病率约0.3-0.4%，在老年人群中高达0.77%。但由于本病的临床表现多样化，易被忽视或误诊。一部分病人，尤其是年轻女性，在疾病早期无明显症状，同时一部分老年女性，并没认识到口、眼干也是一种病。此病的早期诊断一直是临床上的难题之一。国内外多数患者都是通过唇腮活检或者腮腺造影等创伤性检查确诊，依从性较差[5]。
　　原发性干燥症患者血液中有多种自身抗体如ANA、SSA、SSB等。1979 年Alspaugh 等人在对原发性干燥症患者血清的研究过程中发现，人淋巴细胞提取物在培养过程中出现了两种新的自身核抗原就是SSA 和SSB 抗原。SSA 抗原含有两种蛋白即Ｒo52 蛋白和Ｒo60 蛋白，它在人体中以核糖核蛋白复合物的形式存在，它的自身抗体是已知的抗RNP抗体中最常见的也是分布最广的自身抗体。SSB 是由一个单独的分子量为47 － kDa 的蛋白组成。自身免疫性疾病患者血清中，由于这两种抗体经常出现在自身免疫性疾病患者血清中，已被医学界所广泛认同，是国内外公认的原发性干燥症确诊的标记性抗体[6]。但是随着医学的飞速发展，抗SSA、抗SSB的检测在敏感性和特异性方面都很难满足临床发展需要。因此需要有更好的试验方案来完善。
　　类风湿因子的产生跟某些感染有关（如细菌、病毒等），感染后引起体内产生以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种抗体，因此也被称为抗抗体。常见的类风湿因子以多种形式存在如I gM型、IgG型IgA型和IgE型。人体内的类风湿因子普遍存在，并发挥着很多的生理作用。类风湿因子阳性患者常有皮下结节及血管炎等关节外的临床表现等。I在以上几型中gM型的RF阳性率较高可达到为60%-78%。近年研究发现类风湿因子在其他多种自身免疫性疾病中都能大量检测到。在原发性干燥症患者血液中类风湿因子的阳性率可达47%。本研究主要探讨类风湿因子联合检测能提高原发性干燥症诊断中的敏感性。可避免因为单项检查而造成的；漏检，耽误疾病的治疗。
　　参考文献
　　[1]&& 韦三华.& 刘昕阳等&&&&&& 123例干燥综合征患者自身抗体及免疫球蛋白和补体检测分析，国际检验医学杂志。）
　　[2]& 陈永静，黄慈波.&&&& 干燥综合征的诊断治疗进展&&&&& 临床药物治疗杂志.& )
　　[3]& 中华医学会风湿病学分会。干燥综合征诊治指南（草案）[j]。中华风湿病学杂志。）：446
　　[4]& 刘娟 .干燥综合征相关蛋白 .& 皮肤与性病 . 2014.8 （36）
　　[5]& 张孝丰& 汪一萍& 罗建平&&& 抗SSA 抗体、抗SSB 抗体，抗-胞衬蛋白联合检测在干燥综合征中的诊断价值.现代实用医学.2011.12
　　［6］ Ching KH，Burbelo PD，Gonzalez － Begne M，et al． Salivary anti －
　　Ｒo60 and anti － Ｒo52 antibody profiles to diagnose Sjgren＇s Syndrome
　　J］． J Dent Ｒes，) : 445 － 449．
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SSA SSB抗体一般是干燥症的抗体，抗SSA和抗SSB抗体是阳性常见的情况是有干燥综合症的疾病的情况的，但是也可见于红斑狼疮，混合型结缔组织病，硬皮病等 SSA：抗干燥综合征A抗体 SSB：抗干燥综合征B抗体
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（注：干燥综合症病人或亲属，可点击
& & 干燥综合症(sj6gren’s syndrome，SS)，最早是由瑞典眼科医师Henrik Sj~gren’s在1933年提出的，当时定义为干燥性角膜炎、口干燥症和类风湿关节炎(rheumatoid arthriti。.RA)的三联征。随着基础研究的进展，20世纪80年代发现了抗SSA抗体和抗SSB抗体，对SS有了更深的认识。SS是一种自身免疫介导的慢性炎性疾病，以泪腺及涎腺等外分泌腺体淋巴细胞浸润为特点，伴有干燥性角结膜炎和口干的临床表现。当其单独存在时称原发性干燥综合征(p。mary si6gre。，s syndrome，pSS)，与另一个弥散性结缔组织病合并存在时称继发性干燥综合征(secondary sj6gren’s syndrome,sss)。由于采用的诊断标准及所涉及的人群不同，报告的pss的患病率有较大的差别。国外学者报道成人患病率0.1%～0.2%…，为第二常见的自身免疫性风湿病。北京协和医院报告国内成人患病率为0.29%(圣地亚哥标准)～0.77%(哥本哈根标准)。本病多见于年龄30~50岁女性，女性占全部病例的90%2~。免疫遗传学的研究发现，人类白细胞抗原(HLA)一2Ⅱ类抗原与不同自身抗体的形成有关。在§s中，HLA—DR(包括DRBl。0301和DRBl%1 104)~HLA—DQ(包括DQBl$0201、DQAl。0501和DQBl$0301)的共同作用与抗SSA/B抗体的形成有关。& & ss的诊断依赖临床表现和体征、组织学检查、影像学检查和实验室检查。实验室检查尤其是自身抗体检测在SS早期发现、诊断和鉴别诊断中有着重要的价值和意义。下面将阐述近几年国内外对pSS自身抗体谱的研究进展。1抗SSA抗体(anti—SSA antibodies)& & 抗SSA抗体又称抗Ro抗体。1969年C1ark等在系统性红斑狼疮(sLE)患者的血清中发现了两种抗体，分别称为抗Ro抗体矛口抗La抗体。1975年Alspaugh和Tan在ss患者的血清中也检测出两种自身抗体，分别叫做抗SSA抗体和抗SSB抗体，以后证实，SSA和Ro、SSB和La分别为同一抗原。SSA/Ro抗原为核糖核蛋白(RNP)复合物，是由52 000和60 000两种多肽和一组小细胞质RNA即hYl一5RNA组成。SSA/Ro 60有两种交替mRNA剪接结构，即占主要部分的d同型异构体和仅限于少数细胞类型且含量较少的13结构。人类SSA/Ro 60 000蛋白质是由位于19号染色体的1.8 kb基因编码，有一个RNA结合域。SSA/Ro 52抗原也有两种结构(d和t3)，52仅是主要部分，两者是外显子3向外显子5裂解时严生的。SSA/Ro 52 000由位于11号染色体的基因编码，有锌指结构和亮氨酸拉链区，没有特异的RNA结合部位目。SSA/Ro RNP的细胞功能还不十分清楚。有研究表明SSA/R。60蛋白参与了缺陷型5s核糖体RNA前体的丢弃途径，研究表明SSA/Ro 52是一个E3泛素连接酶∽。关于60和52SSA/Ro组分的性质和稳定性是有争议的，而且目前还没有明确证明52多肽是SSA/Ro RNP的固有组分。& & 抗SSA抗体在pSS中的阳性率为25%～65%，但它并不是pSS的特异性抗体，因为它也见于其他结缔组织病，如RA(阳性率3%～15%)、硬皮病(阳性率3%～11%)、多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)(阳性率5%～15%)、SLE以及混合性结缔组织病(McTD)等。单独出现抗SSA 52 000抗体多见于SS，而只有抗SSA 60 000抗体则更多见于SLE。抗SSA抗体阳性的pSS患者主要与血管炎和(或)白细胞减少相关，该抗体常被认为是先天性心脏传导阻滞的高危因素。抗SSA抗体阳性的母亲当具有HLA A1，Cw7和B8而没有B15时，她们显示与易患先天性心脏传导阻滞的HLA等位基因密切相关Ⅲ。2抗SSB抗体(anti—SSBantibodies)& & 抗SSB抗体又称抗La抗体，靶抗原La/SSB位于细胞核(90%)和细胞质(10%)中，包括一个相对分子质量为48 000、与几乎所有RNA聚合酶Ⅲ转录物(包括hYRNA)暂时连接的蛋白质。尽管报道过La/SSB与RNA代谢相关，但也有报道它对于RNA聚合酶Ⅲ充分和正确的转录过程是必需的。& & 与抗SSA抗体相比，抗SSB抗体是ss更特异的抗体，尽管其灵敏度仅为20%12]。其在SS中的阳性率为5%。50%.它与抗SSA抗体同时出现的阳性率达50%，它们同时出现高度怀疑为pSS[”。Tzioufas等附艮道出现针对SSB)La表位p349—364aa的抗体的患者显著的与病程长、复发性腮腺增大、较高比例的腺外病候相关。抗SSA/Ro抗体和抗SSB抗体显著与HLA—DRBl%03等位基因和DQBl*02等位基因相关，抗SSB抗体的MHC限制性表达对于SS的自身免疫应答很重要。& & Franeeschini和Cavazzana{6]报道了检测抗SSA抗体、抗SSB抗体的一些方法，其中RNA沉淀法灵敏度和特异性最高，通常把它作为参考方法，但是常规难于开展。对流免疫电泳(CIE)显示较高的灵敏度(89%)和特异性(100%)，是常规@N~ESSA抗体最可靠的方法，优于western blotti。g和酶联免疫吸附试验(E JJIsA)，尽管ELISA是标准方法。ELISA通常被认为是安全.陕捷灵敏特异的方法，但是其较高的灵敏度对应的却是较低的临床特异性，而且方法假阳性率高。实验室如果用商品化或自己开发的ELISA试剂盒检测抗ssA抗体，还应该用其他方法进行阳性结果的确认。3抗仅一胞衬蛋白抗体(anti—alpha—fodrinantibodies)a一胞衬蛋白是一个具器官特异性的细胞骨架蛋白。抗d一胞衬蛋白抗体是}taneii等于1997年在仪一胞衬蛋白的1 20 000裂解产物中发现的，并认为该抗体是pSS既灵敏又特异的血清学标志物，诊断价值很高。该裂解产物是在炎性涎腺组织细胞凋亡过程中形成的，可能是自身免疫损伤进展和造成永久性组织损伤的原因。此外，有报道称在动物模型和pSS患者体内发现120 000 d一胞衬蛋白与T细胞特异性反应，引起Thl细胞因子上调。该抗体阳性与高丙种球蛋白血症、类风湿因子(RF)阳性、抗SSB抗体阳性相关。最近Chel。等l，噬于d—胞衬蛋白的结和估计其抗原性主要在560氨基酸部位(d一胞肘560)，重组了一套重叠覆盖抗原性表位的蛋白质片段并人：亡合成了来源于d一胞衬蛋白的一套多肽，用于检测血清中的抗体。他们的研究显示“一胞衬560的46～59氨基酸的N末端肽(N46)具最强的抗原活性。抗一N46肽抗体(alph~。一N46PA)在pSS、sLE、RA以及健康对照血清中的琢碜攀分渤为7爱5%?)啦4%，2，。5镑酾&D%，甍砖’菠舔的灵磷度和特异性分别为78.5%和86.8%。结果表明-alpha—N46t’八可以作为诊断pSS的一个有效的方法。& & 但是，近期也有报道…s时抗d一胞衬蛋闩抗体的诊断价值提了质疑，认为它不仅缺乏灵敏度和特异性，而且与疾病的严重程度没有关系，[gA和IgG抗仅一胞衬蛋向抗体与pSS神经系统损害也没有显著的关联，此外其阳性率低和治疗无关，因为他们选取的pSS患者都是未经治疗的忆造成这种争议的原因可能部分是因为所用的检测方法不同，此外，基因和环境因素以及选择的患者的不同也可能造成检测结果的不同，比如，有报道称美闰pSS患者抗仅一胞衬蛋白抗体阳性率低，而日本pSS患者则相反1w。& & 抗a一胞衬蛋白抗体可能参与了ss的早期发病过程，而且，在儿童型pSS或SS血清中，在抗SSA抗体和抗SSB抗体阳性之前就能发现抗旺一胞衬蛋白抗体。willeke：等lq发现抗。一胞衬蛋白抗体IgG阳性的患者病程相对短，虽然抗d一胞衬蛋白抗体阳性率不高，对于ss的诊断帮助不大，但是，该抗体可以选择性的作为疾病活动度的指标。& & 关于抗娃一咆衬蛋白抗体对ss的诊断价值还有待于做更多的临床研究和数据积累。4抗毒蕈碱受体3(M3R)抗体(anti—type 3 muscariniereceptor antibodies)& & 2001年Bacma。等l-o首次报道用人T合成的M3的25肽及鼠哐外泪腺泡细胞膜提取物为抗原，用ELISA方法在有干眼症状的Ss患者血清中检测到抗一M3R抗体，他们认为该抗休可以作为鉴别ss性和非ss性眼干的一个指标。之后，Be,。ukas等在pSS患者的唇涎腺尤其是腺泡里检测到了M3R颗粒。M3R能被粒酶B在一些部位裂解，其裂解片段有司‘能作为自身抗原引起自身抗体产生。毒蕈碱受体3(M3 R)主要分布与外分泌腺及平滑肌，可调解腺体的胆碱能促分泌刺激，抗一M3R抗体与受体反应，可能造成胆碱能高反应性，从而引起腺体功能紊乱。Gao等…l用M3R感染的中国鼠卵巢细胞，在Ss患者的血清中检测到了IgGl、IgG3和IgA型抗一M3R抗体，但在正常人血清中却没有检测到，表明抗一M3R抗体可以作为确诊ss的一个有用的指标。但是Kovacs等㈣报道，虽然抗一M3R抗体常见于pSS(阳性率900A，)但它并不是pSS特有的抗体，也能见于其他自身免疫病，如RA(阳性率35%)，SU￡(阳性率：32%)。5抗着丝粒抗体(ACA)salliot等113】报道AcA在pSS中的阳性率为4.7%，该抗体阳性的ss患者临床和免疫学特征大部分都很相似：出现雷诺现象、干眼体征、外周神经病变以及其他自身免疫疾病尤其是原发性胆汁性肝硬化。此外ACA阳性的ss患者血清出现抗SSA抗体或抗SSB抗体的频率低，但是出现抗ssA抗体/抗SSB抗体或ACA以外的抗体频率高。而且所有AcA阳性的血清ELISA都识别着丝粒蛋白B。}tsu等㈣报道在62例pSS患者中有17例(阳性率27.4%)AcA和抗着丝粒蛋白H抗体(抗一cENP—H抗体)阳性，而且AcA和抗一cENP—H抗体明性的Ss患者抗SSA抗体和抗SSB抗体阴性，表明ss在血清学方面可以分为两组：一组抗SSMSSB抗体阳性，另一组AcA/抗一cENP—H阳性。此外，在人T细胞闩血病一淋巴瘤病毒(HTI.v—I)阴性的Ss患者血清中，ACA的阳性率高于HTI.v—I阳性的ss患者，但是抗SSA/SSB抗体阳性率在两组之间没有差别。Pillerner等m1证明在ss患者m清中发现了抗(：ENP B和cENP c抗体，并.且，AcA识片1 cENP c，表l明cENP c是ss自身抗体的靶抗原。6其他自身抗体除上述抗体以外，ss患者血清中还可J1』现多种自身抗体。比如，约60%pSS患者RF阳性，IgA—RF会在涎腺产生，测定IgM—RF和。lgA—RF能有助于pSS的诊断。约2/3的pSS患者ANA阳性，但对于该病没有特异性。器官特异性自身抗休如抗甲状腺抗体、抗胃壁细胞抗体(阳性率30%)和抗平肌抗体(阳性率62%)也能见于ss㈦。还有报道ss患者抗20 s蛋白酶抗体明显高于RA或正常质控对照组。抗环瓜氨酸肽(ccP)抗体能见于3%～7%的pSS患者，pSS患者该抗体阳性要高度警惕后期可能会HJ现真iE的R AlIl。Szodoray等㈣在27%pSS患者的泪腺中检测到了】gc、IgA和IgM型抗泪腺膜和泪腺细胞溶质片段抗体，其中培A阳性率最高。膜kG抗体水平与临床泪腺分泌功能受损程度呈正相关。膜I洲抗体及细胞溶质IgM抗体水平与抗ssA抗体水平成正比，表明IgG、I出和IgM型抗体可能在泪腺分泌受损进展中发挥作用，可能参与了干燥性角结膜炎的发病机制。& & 综上所述，在pSs患者血清中通常能发现许多自身抗体。其中对抗ssA抗体和抗ssB抗体的研究最深入，两者临床诊断价值也最大。抗Ⅱ一胞衬蛋白抗体和M3R抗体是近几年发现的自身抗体，它们对于ss诊断、分型和预后目前存在争议，还有待进一步的研究。其他非抗核抗体明显的与器官特异性自身免疫病相关，主要是肝脏和甲状腺自身免疫病。抗PcA抗体与慢性萎缩性胃炎和恶性白血病相关。对于ss目前临床常规检测以抗SSA抗体和抗SSB抗体为主。随着免疫学的发展，不断有新的抗体被发现和报道，而且对抗原决定簇的定位及对靶抗原的基因表达的研究越来越精确和深入。对这些抗体的进一步研究不仅有助于疾病的诊断、分型、疾病严重程度和预后的判断，而且对疾病的病因及发病机制的研究亦意义重大。（注：干燥综合症病人或亲属，可点击
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口天木土：
口天木土：
清晨细雨沥沥下：
口天木土：
干燥症患者：
口干患者：→ 血清检查，抗ssA抗体、抗ssB抗体，显阳性，
血清检查，抗ssA抗体、抗ssB抗体，显阳性，
女 | 0个月
健康咨询描述：
血清检查，抗ssA抗体、抗ssB抗体，显阳性，请问是什么病？
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&&&&&&抗SSA／Bo抗体和抗SSB／La抗体是SS患者最常见的自身抗体。其阳性检出率分别是70%～80%和40%，而抗SSB／La抗体的特异性高于抗SSA／Ro抗体，可达50%×60%。该两个抗体的同时检测可提高对SS的诊断率。　部分SLE患者也有抗SSA／Ro抗体和抗SSB／La抗体的检出，其阳性率分别为35%和15%左右。约60%的亚急性红斑狼疮（SCLE）患者，补体缺陷的SLE患者和新生儿狼疮患者可出现抗SSA／Ro抗体阳性。抗SSA抗体可通过胎盘进入胎儿，引起新生儿狼疮综合征，出现典型的SLE皮损和不完全性心脏传导阻滞。另外，单独出现抗SSA／Ro抗体阳性的SLE患者，其肾炎或血管炎的发生率较单独出现抗SSB／La抗体阳性的SLE患者高。因抗SSA／Ro抗体与SSA／Ro抗原形成的免疫复合物，更易沉积于肾脏和血管壁，造成肾脏损伤及血管炎。
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