DNA电泳Marker条带模糊的原因
Marker质量问题：
Maker被DNA酶污染，已经部分降解。
如果是自制的marker，可能粘性末端重新结合。煮沸3-6分钟，冰水骤冷，可使之重新分开。
&凝胶质量问题：
凝胶质量不好。
配胶的水不干净。
胶不均匀，煮沸的时候要多煮沸一段时间（4-5分钟）。
凝胶放置时间太久，被部分降解。
EB浓度太高，降低胶中EB浓度到0.1-0.2ug/ul。
凝胶被DNA酶污染。
&电泳问题：
电泳的电压太高，不要超过20V/cm。
电泳时间长，产热多，导致胶部分融化。
电泳仪电压不稳。
电泳缓冲液陈旧。1X TAE，100V不能使用超过50分钟。
其中，红色标记的更为常见。
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(知名作家)
凌乱前进方向
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DNA marker 前端条带模糊，求解决办法。已有5人参与
不知道为什么我的DNA marker 前端条带模糊，我分析可能有以下几个原因，又一一排除了：
1.1×TAE电泳液时间过长，我换了电泳液，不行；
2.EB染色液的问题，重新配制了，还是不行；
3.夏天气温高，条带扩散快，我就这冰浴中跑电泳，还是不行。
4.琼脂糖胶配的很均匀，没有问题。
请各位高手不吝指教，多谢多谢！
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前端的marker哪里有不弥散的，你去看看说明书，保证上面的参考图都是弥散的。。。。想要不弥散只有短时间跑了，100V 10分钟肯定不弥散。。。。
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跑胶marker跑得不清晰
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胶没配好，或者M有问题了，从来没见过这样的M，再不清楚也得有几道亮的条带啊
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【答案】应助回帖
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好暗，电流多大啊？稳定不啊，感觉也是胶的问题呢
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虫号: 2552035
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引用回帖:: Originally posted by ccchudi at
好暗，电流多大啊？稳定不啊，感觉也是胶的问题呢 电流60mA，那你能告诉我你跑电泳是多大电压和电流啊，胶是1%的琼脂糖加的10000*sybr Green1核酸染料0.8ul，不知道有没有问题 求指教
(初入文坛)
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虫号: 2552035
注册: 专业: 环境污染化学
又跑了一次 还是这样
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引用回帖:: Originally posted by 轩尼骑士 at
又跑了一次 还是这样
920.jpg 我一直都用EB染色，110V恒压大约30~45min看情况了，胶浓度多用0.8%。你的缓冲液是TBE还是TAE？电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，可能产生条带模糊和不规则的DNA带迁移。再有，就是排除一下污染的可能性。换几管marmer，或者换一个批号的琼脂糖试试。。。。。
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引用回帖:: Originally posted by ccchudi at
我一直都用EB染色，110V恒压大约30~45min看情况了，胶浓度多用0.8%。你的缓冲液是TBE还是TAE？电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，可能产生条带模糊和不规则的DNA带迁移。再有，就是排除一下污染的可能性。换几管 ... 用的是TAE缓冲液，这个电泳液只是第二次用，应该不是这个的原因吧
(初入文坛)
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虫号: 2430536
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好像看不到条带啊，我们一般是：一微升的marker混合一微升的loading buffer，共两微上样。
胶浓度是1%，电压：110V，跑大约35分钟，条带很清楚的。
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虫号: 2552035
注册: 专业: 环境污染化学
引用回帖:: Originally posted by 猫di阁楼 at
好像看不到条带啊，我们一般是：一微升的marker混合一微升的loading buffer，共两微上样。
胶浓度是1%，电压：110V，跑大约35分钟，条带很清楚的。 我们买的marker说明书上说自带loading buffer，不需要加，直接5微上的样
(正式写手)
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缓冲液少了没浸没胶！
有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！
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【求助】DNA Marker 条带亮度低的原因
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这个帖子发布于9年零221天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
刚进实验室不久，有4个问题想请教一下：1）今天把以前的胶溶了，然后倒胶再用，胶里面是否要重新加Goldview？2）我重新加了，然后用以前常用的Marker跑电泳（以前是比较清晰的），结果Marker的条带模糊不清，请问是否跟今次用的胶不是现配的有关？3）外今天电泳仪的电压怎么也上不到100V，那模糊不清的原因会跟这个有关吗？4）电泳液淹没过胶的程度是越轻越好吗？就是刚刚没过就是最好吗？谢谢各位！
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回LZ:（个人认为）
1）要加Goldview.
2）有关，最好用新胶，尤其用于纯化。
3）有关，我认为是旧胶的电阻大些，电泳缓冲液用的久了也导致电压升不上去。
4）电泳液刚刚淹没过胶就行，那样能保证电流都是从胶中穿过。
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关于丁香园DNA电泳后 MARKER显示很清楚但是样本却出现了光柱（无条带）请大家帮忙分析一下原因
谢谢
问华粤工程师
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答: 病情分析：
不治疗的话会发展为痔疮
指导意见：
这一般属于胃肠积热气血壅滞的问题建议和胃清热消食
医生询问：
请问饮食以及大小便情绪体质怎么样
答: 你的这种症状应该是肝阳亢盛，中风病人有这种症状表现，再次中风的可能性很高，所以，平时要控制好自己的感情，在医生的指导下，采用中药平肝潜阳，活血通络，如天麻、钩藤...
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