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银耳孢子碱提多糖的提取、分离及其结构分析
作者:刘培勋 高小荣 徐文清 周则卫 沈秀
【关键词】& 多糖
  【摘要】 目的& 对银耳孢子发酵物水难溶性多糖进行提取分离,并对其结构进行分析。 方法& 银耳孢子发酵物用热水提取水溶性组分后,对其水难溶性组分采用不同浓度的氢氧化碱液梯度提取,DEAE-纤维素分离和纯化,纯化后的组分分别进行分子量测定,红外光谱分析,水解并乙酰化后进行气相色谱分析确定单糖组成及摩尔比。 结果& 从银耳孢子发酵物中分离得到四个多糖;TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D。气相色谱分析显示,TFFB-A单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖,它们的摩尔比为5:5:3;TFFB-B单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖,摩尔比为2:2.5:8;TFFB-C单糖组成为:D-葡萄糖、L-鼠李糖,摩尔比1:15;TFFB-D单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖,摩尔比为3:2.5:6:1。 结论& 从银耳孢子发酵物中用碱液梯度提取得到的4个多糖均为中性杂多糖。
  【关键词】& 多糖;银耳孢子;提取分离;结构分析&&&&   Study on extraction isolation and structural analysis of polysaccharides with sodi-um hydroxide from Tremella fuciformis Berk fermentation product&&&&&   LIU Pei-xun,GAO Xiao-rong,XUWen-qing,et al.
  Institute of Radiology,the Chinese Academy of Medical Sci-ences and Peking Vnion Medical College,Tianjin300192,China&&&   【Abstract】 Objective To study the polysaccharides extracted from Tremella fuciformis Berk fermentation product with Sodium hydroxide and characterize their chemical structures.Methods The polysaccharides were extracted from Tremella fuciformis Berk fermentation proudct with gradient Sodium hydroxide(NaOH)after hot water extraction,then neutralized with acid,precipitated with EtOH,deproteinized by the Sevag method,purified on DEAE-32-cellulose column.Four homogeneous polysaccharides named TFFB-A,TFFB-B,TFFB-C,TFFB-D were obtained and their molecular weight and IR were measured.After they hydrolyzed and acetylized,the products were perfomed with GC analysis to determine the composition and mol rate of the monosackcharides.Results The four polysaccharides named TFFB-A,TFFB-B,TFFB-C,TFFB-D were obtained and their structures were investigated.TFFB-A is mainly composed of D-glucose,D-xylose,D-mannose,their ratio is5:5:3;TFFB-B is D-glucose,D-xylose,D-mannose,the ratio is2:2.5:8;TFFB-C is D-glucose,L-rhamnose,the ratio is1:15;TFFB-D is D-glucose,D-xylose,D-mannose,D-galactose and the ratio is3:2.5:6.1.Conclusion The four polysaccharides obtained from Tremella faciformis Berk fermentation product with gradient Sodium hydroxide(NaOH)are all neutral ho-mopolysaccharides.&&&   【Key words】tremella funciformis Bestructural analysis&&&&&&   银耳(Tremella fuciformis Berk),是一种高等真菌,属于有隔担子菌亚纲银耳科。银耳子实体所含化学成分较为复杂,初步分析表明含蛋白质6.7%~10%、碳水化合物65%~71.2%、脂肪0.6%~12.8%、粗纤维2.4%~2.75%及无机盐和水等。目前已知银耳多糖的种类有酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖5种。银耳孢子发酵物的成分与银耳子实体的成分有较大的区别,对银耳孢子发酵物水溶性组分的研究文献报道较多,但对银耳孢子发酵物的碱提取物尚未进行研究。本研究对银耳孢子发酵物热水提取水溶性组分后,水不溶性组分采用不同浓度的氢氧化钠碱液梯度提取,经过酸中和、乙醇沉淀、除蛋白,DEAE-纤维素分离和纯化,得到4个多糖组分,经鉴定为均一多糖,并对其分子量和单糖组成、光谱特性进行了研究 [1~4] 。&&&&   1 仪器与试剂&&&&   1.1 仪器 Shimadzu GC-9A气相色谱仪,Shimadzu LC-10A液相色谱仪,Shimadzu UV-300紫外-可见双波长分光光度计,Shimadzu电子天平(type EB-280M-22),MAGNA-560FT-IR(Nicolet公司),Beckman DU800Spectrophotometer,DYY-III2型稳压流电泳仪(北京六一仪器厂),DYY-Ⅲ31B型电泳槽(北京六一仪器厂)。&&&   1.2 试剂 DEAE-纤维素为Whatman进口分装,层析纸为Whatman产品,醋酸纤维素薄膜为浙江黄岩四青生化材料厂生产,其余试剂皆为国产分析纯试剂。
  2 方法&&&&   2.1 工艺流程 银耳孢子发酵粉→热水煮提→冷却离心→沉淀加一定浓度NaOH液搅拌,离心→上清液→3V乙醇沉析→多糖沉淀→多糖粗品→蒸馏水加热溶解→冷却离心→上清液→Sevag法除蛋白→离心取上清液→减压浓缩→蒸馏水透析→透析袋内容液→3V乙醇沉析多糖→沉淀→真空干燥→精制多糖→离子交换层析(DEAE-32-Cellu-lose)→洗脱液→减压浓缩→3V乙醇沉析多糖→沉淀→银耳碱提取多糖→离子交换层析纯化(DEAE-32-Cellulose)→洗脱液→减压浓缩→3V乙醇沉析多糖→沉淀干燥→均一体银耳碱提取多糖。&&&   2.2 提取分离精制工艺 [5,6]&&&&   2.2.1 水提取 取300g银耳孢子发酵粉(中国医学科学院生物扶研究所药厂提供),加入10倍量的水,煮提约4h。煮后放冷,将提取液离心(15min,4000r/min)。提取后的残渣加入约10倍的水,以相同的方法煮提2次并离心分离,收集沉淀。合并3次所得的上清液,浓缩至小体积后放置,另作它用。取少许沉淀,加入水搅拌溶解后离心(15min,4000r/min),用苯酚-硫酸法检测上清液反应阴性。将所得沉淀于50℃烘箱中烘干,粗多糖重量为188.8g。&&&   2.2.2 碱液提取 取140g粗多糖,加入0.5mol/L NaOH1000ml,搅拦提取6h,离心15min,沉淀以相同的方法再提取2次,合并3次所得的提取液,沉淀另置。将提取液减压浓缩至约原体积的1/3,以1mol/L的HCl中和至pH=7,中和液减压浓缩至小体积。浓缩后的中和液用流动水透析3天。透析后的溶液用3V85%乙醇沉析,离心15min。收集沉淀,得到0.5mol/L NaOH提取的碱溶性多糖(62g)。0.5mol/L NaOH提取后的粗多糖,继用1mol/L NaOH、2.5mol/L NaOH、5mol/L NaOH分别进行提取,得到1mol/L NaOH(48g)、2.5mol/L NaOH(33g)、5mol/L NaOH(10g)提取物。将0.5mol/L NaOH提取物用约700ml水搅拌溶解,加入175ml Sevag试剂(氯仿:正丁醇=4:1),机械搅拌0.5h,离心(15min,4000r/min)。反复用此法除蛋白,直至无蛋白质反应为止。将所得上清液减压浓缩至小体积,流动水透析3天,透析袋内溶液用3V85%乙醇沉析。抽滤,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,真空干燥,得0.5mol/L NaOH提取精制多糖,称重为4.470g。以相同的方法对上述1mol/L NaOH、2.5mol/L NaOH、5mol/L NaOH提取物除蛋白。除蛋白后的各提取物重量分别为3.908g、0.929g、0.399g。&&&   2.2.3 分离、纯化 (1)分离 [7~10] :取600mg0.5mol/L NaOH提取所得精制多糖加入10ml蒸馏水,使之充分溶解,抽滤,取滤液。将滤液加于已经预处理的DEAE-32-纤维素层析柱,用0.1M NaCl溶液洗脱,流速为0.5ml/min,每10ml为1个单位分部收集,苯酚-硫酸法检测。合并单一洗脱峰浓缩至小体积,以流动水透析。透析液加入3V85%乙醇沉析。抽滤,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,真空干燥,多糖重量为148mg。以相同的方法分别对1mol/L NaOH(348mg)、2.5mol/L NaOH(558mg)、5mol/L NaOH提取物(399mg)进行DEAE-32-纤维素柱层析,分别得到单一洗脱峰。1M,2.5M,5M提取物分别得多糖113mg,180mg,157mg。&&&   (2)纯化:用(1)相同的方法分别对0.5M、1M、2.5M、5M提取物所得多糖用DEAE-32-cellulose柱层析纯化,洗脱液为0.1MNaCl,苯酚-硫酸法检测。所得多糖纯品重量分别为TFFB-A112mg、TFFB-B82mg、TFFB-C98mg、TFFB-D121mg。&&&   2.4 纯度检查(醋酸纤维素薄膜电泳法) 取醋酸纤维素 薄膜(2cm×10cm),置于缓冲液中浸泡10min后取出,吸去 多余的水分,在薄膜中央点样,电压为240V,电泳约40min。电泳完毕后,取出薄膜,置于染色液中染色15min后脱色。结果TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D四个样品于薄膜负极方向均有一个斑点。
  2.5 单糖组成分析&&&   2.5.1 纸层析 分别取各个多糖纯品10mg溶于2ml2mol/L三氟乙酸中,封管,沸水中水解6h。冷却后点样于What-man No.1层析滤纸上,用乙酸乙酯-吡啶-水-冰醋酸(5:5:3:1)展开剂饱和后展开,展开后用苯胺-邻苯二甲酸显色,用相应的标准品做对照。结果如图1。&  图1 银耳碱提取多糖水解物纸层析结果(略)1D-葡萄糖 2D-半乳糖 3D-甘露糖4D-木糖& 5TFFB-A& 6TFFB-B7TFFB-C& 8TFFB-D& 9葡萄糖醛酸10D-阿拉伯糖 11鼠李糖 12D-果糖&&&   从图1中可以看出,TFFB-A单糖组成为:木糖、葡萄糖或甘露糖;TFFB-B单糖组成为:木糖、葡萄糖或甘露糖;TFFB-C单糖组成为:鼠李糖、葡萄糖或甘露糖;TFFB-D单糖组成为:木糖、葡萄糖或甘露糖或半乳糖。各糖的Rf值之比为:D-葡萄糖;D-半乳糖;D-甘露糖;D-木糖:葡萄糖醛酸:D-阿拉伯糖:L-鼠李糖:D-果糖=1:0.9:1:1.2:0.8:1:1.5:0.8。&&&   2.5.2 气相色谱分析 将2.5.1所得水解液在水浴上减压蒸干,并烘干,得水解物。将水解物加入10mg盐酸羟胺及1ml无水吡啶,温热溶解后置于90℃水浴中加热30min,冷至室温后,加入1ml无水乙酸酐,继续在此水浴上加热30min,乙酰化完成后,进行气相色谱分析,并用乙酰化后单糖标准品对比。色谱柱固定液为SE-52,色谱柱为石英毛细管柱,柱长30m;柱温在180℃维持5min后每分钟升高3℃,在250℃维持10检测器为FID;进样室温度为270℃;载气为N 2 ,流速为50ml/min。&&&   2.6 多糖分子量测定 [11]& 将各个多糖纯品进行高效凝胶柱色谱(HPGPC)分析,测定分子量。色谱柱为TSK G4000PWXL(6×300mm);检测器为S柱温为35℃;进样量为20μl;流动相为0.7%Na 2 SO 4 ,流速为0.5ml/min。&&&   2.7 多糖的红外光谱测定 将各个多糖纯品进行傅立叶转换红外光谱测定。仪器分辨率为4cm,扫描次数为20次。&&&   2.8 多糖的紫外光谱测定 将多糖溶于水,配成0.2mg/ml的溶液,进行紫外扫描,波长为200~800nm。
  3 结果&&&&   3.1 本文从银耳孢子发酵物中用碱液提取的方法得到4个多糖组分,分别命名为TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D。经鉴定为均一体多糖。且都为中性多糖,不含糖醛酸。&&&   3.2 通过水解、乙酰化进行气相色谱分析,鉴定了这4个多糖的单糖组成。TFFB-A单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖,它们的摩尔比为5:5:3;TFFB-B单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖,它们的摩尔比为2:2.5:8;TFFB-C单糖组成为:D-葡萄糖、L-鼠李糖,摩尔比为1:15;TFFB-D单糖组成为:D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖,摩尔比为3:2.5:6:1。&&&   3.3 用高效凝胶柱色谱法测定了这4个多糖的分子量。结果显示,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D重均分子量分别为6.3×10 4 、6.4×10 4 、5.9×10 4 、5.1×10 4 。&&&   3.4 红外光谱扫描结果显示,4个多糖在3400cm的宽峰为0~H和N~H的伸缩振动,2930cm为C~H的吸收峰,两峰是糖类的特征吸收峰;在1022cm和1150cm附近处都有吸收,说明它们都是吡喃糖;在850cm附近处都有吸收,说明多糖结构中存在着α型糖苷键(即α端基差向异构体)。
  3.5 紫外扫描结果显示在260nm和280nm处没有吸收,说明不含蛋白质和核酸。&&&&   4 讨论&&&&   从银耳中提取水溶性多糖,国内外均有报道。本文从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到4个均一体多糖,均为中性多糖,未见有文献报道,从现有数据看可以认为是新的杂多糖。&&&   在对多糖进行水解时,我们进行了预实验,采用了三氟乙酸和硫酸水解的方法,结果显示,硫酸水解后用碳酸钡中和的过程中,产生的大量硫酸钡沉淀会吸附水解产生的单糖,影响纸层析结果。采用三氟乙酸水解,剩余的三氟乙酸可减压蒸干,不会产生沉淀,因此最后采用三氟乙酸水解法。&&&   多糖分子量多数文献采用凝胶柱层析的方法进行测定,但这种方法误差较大。本文采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖的分子量,具有快速、高分辨和重现性好的特点。上述多糖样品曾用醋酸纤维素薄膜电泳法进行纯度鉴定,显示单一斑点,但是在HPGPC图谱中仍然可以明显看到其间含有小分子杂质,这表明HPGPC法在比其它方法更准确。&&&   单糖的组成分析中,纸层析结果定性较为简便,但是灵敏度较差,本试验中由于葡萄糖与甘露糖的Rf值非常接近,因此难以单凭纸层析判断各个样品的单糖组成,在对多糖水解物进行了乙酰化后进行气相色谱分析才能最终判断多糖的单糖组成。&
  【参考文献】&&&&   1 杨世海,尹春海,缪双红.银耳多糖及其药理作用的研究进展.中草药,):153-157.&&&   2 周爱如,吴彦坤,候元怡.银耳多糖抗肿瘤作用的研究.北京医科大学学报,):150.&&&   3 夏尔宁,陈琼华.银耳子实体多糖的分离、分析及生物活性,真菌学报,):166-174.&&&   4 高其品,张大军.银耳多糖及其抗肿瘤活性的研究(1).天然产物研究与开发,):43-48.&&&   5 Yoshiaki SONE,Akira MISAKI.Purification and characterization ofβ-D-Mannosidase andβ-N-Acetyl-D-Hexosaminidase of Tremella fuciformis.J.Biochem,35-1144.&&&   6 于嘉屏,许绍辉,张国治.DEAE纤维素柱层析法分离β-N-乙酰氨基已糖苷酶同工酶.第二军医大学学报,):350-352.&&&   7 董群,郑丽伊,方积年.改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究.中国药学杂志,):550-553.&&&   8 司世麟,赵春桂,薛晓梅,等.苯酚-硫酸法色定糖法的应用.生物化学与生物物理进展,-70.&&&   9 Shigeo Ukai,Kazuo Hirose,Tadashiiho,et al.Polyaccharides in Fungi.I.Purification and characterization of acidic heteroglycans from aqueous extract of Tremella fuciformis Berk.Chem Pharm Bull,):.&&&   10 Shigeo Ukai Kazuo Hirose,Tadashi Kiho,et al.Polysaccharides in Fun-gi.II.Structure analysis of acidic heteroglycans from Tremella fuci-formis.Berk.Chem Pharm Bull,):338-344.&&&   11 魏远安,方积年.高效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度及分子量.药学学报,)532-536.&&&&   (编辑:一 坤)
  作者单位:300192天津,中国协和医科大学中国医学科学院放射医学研究所&
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导师刘会洲
学位授予单位中国科学院研究生院
学位专业化学工艺
摘要从稀溶液中吸附回收金属离子是一种绿色高效的方法,尤其针对稀贵金属,如稀土和贵金属,具有重要的环保意义和经济效益。生物吸附法以生物质为吸附剂,具有原料来源广泛、种类繁多、成本低廉、生物相容的特性。合成的吸附剂无毒无害、易于生物降解。更重要的是生物质吸附剂含有丰富的羧基、氨基、羟基等活性官能团,可以络合金属离子也便于吸附剂的进一步修饰,有望成为传统吸附材料的补充或替代。本论文选择三价稀土离子 (如Nd(III)) 和贵金属离子 (如Au(III)) 作为模型金属离子,着眼于提高生物质吸附剂的稳定性、吸附容量和分离选择性,开展生物吸附回收分离溶液中金属离子的应用基础研究,进一步丰富金属离子的生物吸附机理基础理论研究 (1) 首次采用溶胶-凝胶法,一步合成了SiO2包埋O-CMCH的复合生物质吸附剂 (SiO2/CMCH)。发现O-CMCH固定化可以提高O-CMCH对Nd(III) 吸附能力,自由-NH2和-COO-对Nd(III) 的配位有明显的协同效应。 (2) 首次采用溶胶-凝胶法一步合成了包埋纳米二氧化硅的海藻酸钙复合吸附剂 (ALG-SiO2),纳米二氧化硅包埋可以显著改善海藻酸钙基吸附剂的水溶胀性和机械强度,吸附剂循环性能优良,并可简化液固分离流程;首次合成了以海藻酸钙为核以硅酸钙为壳并包埋萃取剂P507的复合吸附剂 (ALG-CaSiO3-P507),加入P507可以提高稀土的吸附容量,显著提高吸附剂对相邻稀土元素之间的分离因素以及Nd(III) 与非稀土的分离因素,硅酸钙外壳可以缓解吸附剂对P507的释放,提高吸附剂的循环性能。首次合成了包埋聚谷氨酸的海藻酸钙复合吸附剂 (ALG-PGA),包埋聚谷氨酸可以显著提高吸附剂对稀土的吸附容量,与文献比较,ALG-PGA是对Nd(III) 吸附容量最高的吸附剂,包埋PGA可以提高稀土与非稀土离子的分离因子,并且大分子PGA不会泄露,循环性能优良。首次提出ALG基吸附剂对镧系元素能表现出明显的凸型“四分组效应”。吸附机理是-COOH和-POOH起作用的阳离子交换吸附机理,同时PGA中的-HN-C=O有协同配位效应。 (3) 首次采用水热碳球对溶液中的金离子进行回收。金的吸附属于络合-还原吸附机理,生成的单质金纳米颗粒将可以直接焚烧回收也可用酸性硫脲解吸后回收,吸附剂经过碱活化后可再生。CMS-M能高选择性地将金从贱金属和其他贵金属的盐酸介质中分离出来,分离因子在1000以上。采用还原与吸附耦合的方法,可以大大提高吸附剂对金的吸附容量也可以改善还原法对金回收率不高的缺点,简化液固分离流程。 (4) 首次采用玉米秸秆、纸和棉花为原材料,分别通过碱活化、NaIO4选择性氧化以及氨基硫脲修饰成功地制备了硫脲修饰的生物质吸附剂,硫脲修饰可以显著提高金的吸附容量。Au(III) 的吸附主要属于络合-还原吸附机理。在高酸度下,AT-S能高选择性地将金从贱金属 (如Co(II)、Cu(II)、Ni(II))和Rh(III) 的盐酸介质中分离出来。添加EDTA后,可以在整个实验pH范围内实现与Co(II)、Cu(II)、Ni(II)和Rh(III) 的有效分离。在25℃下,AT-S对Au(III)的饱和吸附量为21.4 mmol/g,与文献比较,AT-S是Au(III) 吸附容量最高的吸附剂。负载了金的AT-S-Au用酸性硫脲溶液可实现Au(III) 的解吸,并可实现AT-S的循环再生。
其他摘要It is a high efficient and green technology to recover and separate of metal ions from complicated dilute aqueous solution by solid-liquid adsorption, especially for rare and precious metals, not only for the benefit of environment protection but also with great economic value. Biosorption is considered as a potential supplementary or substitute technology for the recovery of metals from solutions. (1) novel carboxymethyl chitosan (O-CMCH) with -COOH and -NH2 adsorbents entrapped by silica gel (abbr. as SiO2/CMCH) has been prepared by one step sol-gel method. Cation exchange between Nd(III) and -COOH are the primary adsorption mechanism, at the same time -NH2 has the obvious synergistic coordination effect. Complete desorption can be reached when the concentration of HCl is more than 0.1 M. (2) Novel Ca2+ crosslinked alginate (ALG) hybrid beads including ALG doping with nano SiO2 (abbr. as ALG-SiO2), ALG core containing extractant P507 with CaSiO3 shell (ALG-CaSiO3-P507), and ALG entrapped γ-poly glutamic acid (PGA) with ultra-high molecular weight (ALG-PGA) have been prepared. For the whole lanthanides, it exhibits a distinct ‘tetrad effect’ with the increasing atomic number. The doped SiO2 can enhance the mechanical strength of the beads and reduce the swelling properties of the hybrid adsorbents. The adsorption capacity can be improved by adding P507 and PGA, especially PGA. The selectivity among rare earths and selectivities between Nd(III) and non rare earths can be increased by adding P507 and PGA, especially P507. The leaking rate of P507 can be delayed and reusability have been improved owing to the introduction of CaSiO3 crust. ALG-SiO2 and ALG-PGA show no observable loss and leaking of ionophores during the adsorption process. Fast desorption of Nd(III) can be reached when the concentration of HCl is more than 0.1 M within 20 min. Cation exchange between Nd(III) and -COOH in ALG and PGA and -POOH in P507 is proposed as the main adsorption mechanism, and besides -NH-C=O in PGA is believed to have the synergistic coordination effect. (3) Adsorption behaviors and mechanism of Au(III) from aqueous acidic chloride media with the hydrothermal carbon microspheres (CMS), which are prepared from saccharides by hydrothermal method, have been investigated. Highly selective adsorption tawards Au(III) over Pt(IV), Pd(II), Rh(III) and part of base metals including Fe(III), Co(II), Cu(II), Ni(II) from aqueous acidic chloride media can be achieved via monodisperse CMS. Taking glycine as an assistant reductant, the adsorption efficiency with carbon microspheres can be improved effectively compared with the system of single carbon microspheres or single glycine. Such as, the adsorption capacities of Au(III) by CMS can increase up to 11.2 from 2.13 mmol/g at 25℃ in the presence of 0.06 M glycine. The maximum recovery efficiency of Au(III) can increase from ~ 87% to ~ 99% by adding 10 mg CMS into glycine system. Besides, the solid-liquid seperation process can be facilitated a lot by adding CMS. Crystalline structure, XRD, FTIR and SEM images of the CMS and CMS-Au were analyzed, which demonstrates that Au(III) is reduced to elementary gold and fixed on the surface of the CMS. The loaded gold on the surface of CMS can be desorbed by acidic thiourea solution and the sorbents can reused after reactivation by NaOH solution. (4) Novel biomass gels with aminothiourea groups synthesized from corn stalk, paper and cotton abbreviated as AT-S, AT-P, and AT-C, have been prepared for the first time. The maximum loading capacities are evaluated as up to 21.4, 19.0, and 3.28 mmol/g at 25℃ for AT-S, AT-P, and AT-C, respectively. At pH < 2, the gel was found to be highly selective for Au(III) over other metals (e.g. Rh, Cu, Co and Ni), especially, the addition of EDTA into the aqueous phase can greatly enhance the separation effect during the whole pH range. The adsorption process belongs to typical chelation-reduction reaction, where Au(III) ha
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王福春. 生物基复合材料对稀土和金的吸附性能研究[D]. 中国科学院研究生院,2014.
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