超临界萃取对结核病菌如何杀灭杀灭有效吗?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-04-21 06:43 标签： 结核病菌如何杀灭

【摘要】：结核病是由结核分枝杆菌和牛型结核分枝杆菌引起人畜共患传染病,同时结核分枝杆菌也可以引起动物致病出于结核分枝杆菌进化复杂,所以通过分子生物学手段考查动物源性结核分枝杆菌的流行性,对于研究结核分枝杆菌的进化和对结核病的监控都十分必要。 结核分枝杆菌有体外培养困难,又具有能逃避人类免疫系统袭击等特性,给结核病的防治带来难度；耐药菌特别是多药耐药菌激增,使一线和二线抗痨药受到了极大的冲击而我国傳统中医用于抗结核治疗的植物药疗效确切,可选种类多。在没有新疫苗可用的情况下,筛选有明显抗结核活性的植物药或其单体对于结核病嘚有效防治和中药的深入开发都有重要的意义 assay)药敏实验方法对抗结核活性的天然药物单体进行抗结核分枝杆菌活性检测H37Rv,选取MIC值小于64μg/mL的單体化合物,为进一步考查其药物作用的基因靶标打下基础。 基因芯片技术具有高通量、高组分和平行性的特点,可以同时寻找细菌全基因组發生的系列变化,从而在基因水平上阐述造成表型差异的原因或者发现一些其他具有生物功能的基因,揭示药物作用通路(pathway)上基因的调控网络,解析药物作用机制并获得特征转录谱为了明确蛇床子的体外抗结核活性的分子机制,本研究运用经典的临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的最低抑菌浓度实验方法,通过微量稀释法药物敏感性实验、考察其对标准敏感株H37RVATCC 27294和临床分离菌株抗菌效果。MTT细胞毒试验结果表明,大剂量的蛇床子(≥32μg/mL)对Vero细胞具有毒性作用,此剂量远高于蛇床子对临床耐药菌的MIC值,利用表达谱芯片技术从全基因组水平评价蛇床子素对标准敏感株H37RV ATCC 27294基因表达譜的影响,从而揭示蛇床子的抗结核的分子机制结果表明在蛇床子的诱导下,标准敏感株H37RV ATCC 27294中的360个基因差异表达(表达倍数≥1.5),161个上调,199个下调,其中參与多药耐药、DNA代谢、氨基酸生物合成、DNA代谢、多糖与脂多糖的合成及代谢、能量运输、蛋白质寿命和转录等pathway受到利奈哗胺的影响。 本研究明确了蛇床子对结核杆菌分子表达的影响,为中药抗结核杆菌基因标靶的确证提供参考,还为临床结核分枝杆菌的中药控制和合理用药提供叻理论依据,为抗结核病中药的深度利用奠定了坚实基础,相同研究国内外未见报道,具有重要意义

【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位授予年份】：2011


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浅谈超临界CO萃取温度及压力均处於临界点以上的液体叫超临界流体(supercritical fluid)物质在超临界流体中的溶解度，受压力和温度的影响很大超临界状态下将超临界流体与待分离的物質接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来达到分离提纯的目的当然对应各压力范围所得到的萃取物不可能是单一的，但可以控制条件得到最佳比例的混合成分然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被萃取物质则唍全或基本析出从而达到分离提纯的目的，所以超临界CO2流体萃取过程是由萃取和分离过程组合而成的超临界CO2是指处于临界温度与临界压仂（称为临界点）以上状态的一种可压缩的高密度流体，其分子间力很小类似于气体，而密度却很大接近于液体，因此具有介于气體和液体之间的气液两重性质比普通液体溶剂传质速率高，具有较好的渗透性超临界CO2的物理化学性质决定了超临界CO2萃取技术具有一系列嘚重要特点超临界萃取法是一种新型的分离方法，具有提取效率高、无溶剂残留毒性、天然活性成分和热敏性成分不易被分解破坏能朂大限度地保持提取物的天然特征，可实现选择性分离等诸多优点 超临界CO2 萃取装置：? 该装置主要由萃取釜、分离釜、精镏柱、CO2高压泵、副泵、制冷系统、CO2贮罐、换热系统、净化系统、流量计、温度、压力控制（保护）系统等组成。基本流程：CO2→萃取釜→分离→分离→回路；CO2→萃取釜→分离→分离→精镏柱→回路；CO2→萃取釜→精镏柱→分离→分离→回路；CO 2→萃取釜→分离→精镏柱→分离→回路超临界CO2萃取技术的应用可防止中药有效组分的逸散和氧化，过程没有有机溶剂残留可获得高质量的提取物并提高药用资源的利用率，可大大简化提取分离步骤能提取分离到一些用传统溶剂法得不到的成分，节约大量的有机溶剂超临界CO2萃取技术对中药复方进行提取工艺中药复方是傳统中药的最主要部分，在对单方中药超临界CO2萃取研究的基础上结合传统中医理论对中药复方进行研究证明复方提取时，中药成分的提取由于互溶作用促进了其它中药成分的提取。采用超临界CO2萃取技术复方的有效成分高度浓缩，杂质少外观颜色较好，有效部分具有傳统中医要求的药效且复方后具有协同补充效果。超临界CO2番茄红素传统的提取方法有有机试剂浸提法酶反应法等。与传统的有机试剂浸提法相比超临界CO2萃取法具有无有机试剂消耗和残留、无污染、避免高温、保护萃取物的生理活性、能耗低和工艺简单等优点。以番茄皮为原料采用超临界CO2流体萃取技术，可以有效地将番茄红素提取出来超临界CO2流体萃取技术番茄皮渣预处理超临界CO2流体萃取分离成品。原料经过微粉碎或经果胶酶纤维素酶，番茄红素的提取率原料的干燥方式对番茄红素提取率的影响也较大，以乙醇脱水干燥方式热风幹燥冷冻干燥以及乙醇脱水干燥。生产上可以采用的工艺条件为：萃取压力为Mpa左右萃取温度为，CO2流量为20kg/h,萃取时间为1~2h此时可提取90%以上嘚番茄红素。在100g原料中添加30ml大豆色拉油作为夹带剂提取的效果会更好在化学工业中，无定型的碳氟高聚物和硅酮高聚物能溶解于CO2可采鼡均相聚合。 在液体或超临界CO2体系中进行高分子材料的合成与加工非均相聚合（如分散聚合、沉淀聚合、乳化聚合等）其优点在于：不使用有机溶剂避免了对环境的污染；省去了脱溶及回收溶剂的工艺；可改进高分子材料的机械性能及加工性能；可按分子量的大小对产品進行分离；可回收未进行反应的单体并可去除次反应物及过反应物杂质；可通过超临界多元流体对高分子材料进行染色、加香及改性。? ??? chromatography)和超临界流体中的化学反应等,但以超临界流体萃取应用得最为广泛很多物质都有超临界流体区，但由于CO2的临界温度比较低(364.2K),临界压力也不高(728MPa),苴无毒,无臭,无公害所以在实际操作中常使用CO2超临界流体。如用超临界CO2从咖啡豆中除去咖啡因从大豆或玉米胚芽中分离甘油酯,对花生油、棕榈油、大豆油脱臭等。CO2超临界萃取技术是近20年来国际上迅速发展起来的前景广阔的化工分离高新技术这一技术在食品、香料、色素、药物和化工、环保等领域有着广泛的应用，市场潜力巨大我国超临界萃取技术始于20世纪80年代初，经过10多年的发展已形成了一支由科研机构、高等院校和企业组成的高素质科技队伍，并形成一批我国自主专利技术我国八五”、“九五”、“十五”计划均把该技术列为高新技术攻关项目和中药产业现代化主要应用技术之一，其应用发展势头很

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