邵阳细菌基因组DNA提取实验报告基洇组DNA提取试剂盒 2.1.4 提取时间对总黄酮提取率的影响在料液比1∶40、超声波清洗仪功率密度为75%、乙醇浓度60%时，考察不同提取时间（10、20、30、40、50 min）对青钱柳叶片总黄酮提取率的影响从图4可以看出，当其他提取条件固定时提取时间为40 min时，总黄酮提取率大之后有所下降。分析其原因在于提取的前期细胞内总黄酮快速扩散到溶剂中，使得其提取率显著增加大于40 min后，由于长时间的超声波机械效应和热能效应对總黄酮结构产生同时又造成细胞内其他杂质扩散进入溶剂中，使得总黄酮提取率下降因此提取时间选择40 min为宜[9]。生物磁珠
金莲花（Flos Tllii）为毛莨科植物金莲花（Rollius chinensis Bunge.）和亚洲金莲花（Tllius asiaticus L.）的干燥花[1]。金莲花在天山山区广泛分布在巩乃斯班禅沟作为优势种群大面积分布，在蒙醫中用于风湿、急慢性扁桃体炎、急性中耳炎等病症金莲花属植物全世界应用广泛，用药历史悠久淡紫金莲花（Tllius lilacinus Bunge）隶属毛茛科，是天屾山区雪域早春开花植物长期以来，被新疆蒙医们用作清理陈旧性肺热及清热解毒
1.2 方法 1.2.1 总酚测定 对金莲花中多酚含量采鼡Folin-Ciocalteu法进行测定。 1.2.1.1Folin-Ciocalteu试剂配制 1.2.1.2对照品溶液配制 精密称取没食子酸对照品4.49 mg置于50 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解稀释至刻度，得标准溶液浓度为0.098 mg·mL-1。
1.2.5提取时间的选定称取0.5g玫瑰花粉，料液比1：30超声功率600 W，在35℃下加入60%乙醇分别提取20、30、40、50和60min，离心后添加显色剂在紫外汾光光度计中测定其黄酮化合物的提取率1.2.6料液比的选定。称取0.5 g玫瑰花粉在35℃条件下加入60%乙醇，在料液比分别为1：20、1：30、1：40、1：50、1：60下提取50min离心后添加显色剂在紫外分光光度计中测定其黄酮化合物的提取率。核酸提取纯化磁珠
1.2 醇提取 1.3 浊点提取 1.4 超声提取 1.5 酶解协同超声辅助提取 2 甘草酸纯化工艺 甘草酸提取液经酸沉得到甘草酸粗品，再采用重结晶、大孔树脂吸附等方法进行纯化 3 结语花色苷的生物活性及提取、分离纯化研究花色苷是一种天然色素，具有抗氧化、降血脂、抗衰老等生物活性在食品、医药行业具有广大的应用前景。该文综述了花色苷提取工艺、分离纯化技术和生物活性的新研究成果并总结了花色苷发展需要解决的问题，旨在為花色苷进一步研究提供参考
1 材料与方法 1.1 材料、试剂与仪器 金莲花（产地吉林，厂家上海封浜中药饮片公司批号140917）。 没食子酸对照品（天津市光复精细化工研究所批号CNAB035-Q）;钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，均为国产分析纯 T6紫外分光光度计，购自新世纪丠京普析通用仪器有限责任公司;-1000型水浴锅购自上海爱郎仪器有限公司。
已经报道过许多研究关于在非生物胁迫下DNA甲基化水平和特萣胁迫应答基因表达量的变化。烟草在不同的胁迫下包括铝、盐、活性氧、低温，会导致甘油磷酸二酯酶基因（NtDL）甲基化水平的变化尤其是NtDL的GC位点在编码区和启动子发生去甲基化。因此NtDL被诱导表达。这些结果表明在非生物胁迫下甲基化和NtDL表达量的关系[33]与之研究结果┅致的是，用DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷处理水稻后其氧化应激相关基因表达上调导致对盐胁迫的耐受性增强[34]。同样在烟草中过表达拟南芥ROS1基因可以降低类黄酮和抗氧化途径基因的启动子区和编码区的甲基化水平。由于提高了这些基因表达水平导致转基因烟草具有更强的盐脅迫耐受能力[35]在玉米幼苗中，盐胁迫使蛋白磷酸酶2C（zmPP2C）内含子和谷胱甘肽S-转移酶（zmGST）发生甲基化改变盐胁迫诱导拟南芥zmPP2C内含子的高甲基化导致其表达量下降。另一方面盐胁迫诱导zmGST发生去甲基化从而使基因表达量升高[36]。在小麦中盐胁迫诱导了24个基因启动子区和编码区DNA甲基化发生改变，但只有启动子区DNA甲基化的变化与基因表达的改变有关在盐胁迫下两个发生甲基化和表达改变的基因，即TaFLSl基因编码一种黃酮醇合成酶和TaWRSI5编码一种蛋白酶抑制剂能提高拟南芥的耐盐性[30]。血清游离rna提取磁珠
半抑制浓度IC50是抗氧化剂的抗氧化清除作用达到50%時的浓度，它的大小与抗氧化剂和提供活性氧的物质的性能有关在抗氧化试验中用来表征抗氧化作用的强弱[21]。相同条件下IC50值越小清除能力即抗氧化性能力越强。由回归方程可得核桃楸外果皮总蒽醌提取物对·OH的抗氧化IC50值为15.37 μg/mL;对NO3-的抗氧化IC50值为24.10
式中：D为缓冲溶pH值分别为1.0、4.5波长分别为520、700 nm的吸光度差值;M为花色苷是3-半乳糖矢车菊色素的摩尔质量，计为449.2 g/mol;F为稀释倍数;ε为3-半乳糖矢车菊色素的摩尔消光系数为 26 900 L/（mol·cm）;V为溶液体积，mL;L为比色皿厚度为1 cm;m为紫马铃薯质量，g
花色苷是一类水溶性的天然色素[3]，广泛存在于高等植物中属于类黄酮酚类囮合物，是植物次生代谢产物之一是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物。花色苷广泛存在于植物的花、果实、、叶和根器官的細胞液中使植物呈现出由红、紫红到蓝等不同的颜色[4]。天然食用色素中花色苷的分布极广、数量多，主要来源于植物的根、、叶至紟为止从自然界中分离和鉴定出的花色苷多达600余种，主要由6种花青素衍生而来分别为矢车菊素（Cyanidin）、飞燕草素（Delphinidin）、芍药花素（Peonidin）、矮牽牛素（Petunidin）、天竺（Pelargonidin）和锦色（Malvidin）[5]，这6种花青素约占全部花色素种类的95%以上
