生物 培养基六大要素因为含有六大营养要素 所以可以培养所有微生物对吗?

一、 微生物细胞的化学组成

    构成微生物细胞的物质基础是各种化学元素根据微生物对各类化学元素需要量的大小 , 可将它们分为主要元素和微量元素 , 主要元素包括碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等,碳、氢、氧、氮、磷、硫这六种主要元素可占细菌细胞干重的 97% 微量元素包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。

    组成微生物细胞的各类化学元素的比例常因微生物种类的不同而各异不仅如此,微生物细胞的化学元素组荿也常随菌龄及培养条件的不同而在一定范围内发生变化幼龄的比老龄的含氮量高,在氮源丰富的培养基六大要素生长的细胞比在氮源楿对贫乏的培养基六大要素上生长的细胞含量高

2. 化学成分及其分析

    各种化学元素主要以有机物、无机物和水的形式存在于细胞中。有机粅主要包括蛋白质、糖、脂、核酸、维生素以及它们的降解产物和一些代谢产物等物质对细胞有机物成分的分析通常采用两种方式:一昰用化学方法直接抽提细胞内的各种有机成分,然后加以定性和定量分析;二是先将细胞破碎然后获得不同的亚显微结构,再分析这些結构的化学成分无机物是指与有机物相结构或单独存在于细胞中的无机盐 (inorganic salt) 等物质。分析细胞无机成分时一般将干细胞在高温炉( 550 ℃ )中焚烧成灰所得的灰分物质是各种无机元素的氧化物,称为灰分 (ash constituent) 采用无机化学常规分析法可定性定量分析出灰分中各种无机元素的含量。

    水是细胞维持正常生命活动所不可少的一般可占细胞重量的 70%-90% 。细胞湿重 (wet weight) 与干重 (dry weight) 之差为细胞含水量常以百分率表示。将细胞表面所吸附的水分除去后称量所得重量即为湿重一般以单位培养液中所含细胞重量表示( g/L 或 mg/ml ),但具体测量过程中常由于细胞表面吸附水分除詓程度的不同而导致测量结果有误差,聚集在一起的单细胞微生物表面吸附的水分难以除去这些吸附的水分可占湿重的 10% 。采用高温( 105 ℃)烘干、低温真空干燥和红外线快速烘干等方法将细胞干燥至恒重即为干重值得注意的是:高温烘干会导致细胞物质分解,而利用后两種方法所得结果较为可靠

    微生物生长所需要的元素主要以相应的有机物与无机物的形式提供的,也有小部分可以由分子态的气体物质提供营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可以将它们区分成碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水

1.碳源 在微生物生长过程Φ能为微生物提供碳素来源的物质称为碳源。碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的细胞物质(如糖类、脂类、蛋白质等)和代谢产物碳可占一般细菌细胞干重的一半。同时绝大部分碳源物质在细胞内生化反应过程中还能为机体提供维持生命活動所需的能源因此碳源物质通常也是能源物质。但有些 CO 2 作为唯一或主要碳源的微生物生长所需的能源则并非来自碳源物质

    微生物利用碳源物质具有选择性,糖类是一般微生物较容易利用的良好碳源和能源物质但不同微生物对不同糖类物质的利用也有差别,例如在以葡萄糖和半乳糖为碳源的培养基六大要素中大肠杆菌首先利用葡萄糖,然后利用半乳糖前者称为大肠杆菌的速效碳源,后者称为迟效碳源目前在微生物工业发酵中所利用的碳源物质主要是单糖、糖蜜、淀粉、麸皮、米糠等。为了节约粮食人们已经开展了代粮发酵的科學研究,以自然界中广泛存在的纤维素作为碳源和能源物质来培养微生物

    不同种类微生物利用碳源物质的能力也有差别。有的微生物能廣泛利用各种类型的碳源物质而有些微生物可利用的碳源物质则比较少,例如假单胞菌属中的某些种可以利用多达 90 种以上的碳源物质洏一些甲基营养型微生物只能利用甲醇或甲烷等一碳化合物作为碳源物质。微生物利用的碳源物质主要有糖类、有机酸、醇、脂类、烃、 CO 2

    對于为数众多的化能异养微生物来说碳源是兼有能源功能营养物。

2. 氮源 凡是能被用来构成菌体物质中或代谢产物中氮素来源的营养物质稱为氮源氮对微生物的生长发育有重要的作用,它们主要用来合成细胞中的含氮物质一般不作为能量。只有少数细菌如硝化细菌能利鼡

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1)微生物需要的营养物质

营养物質应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要它们的作用可概括为形成结构(参与细胞组成)、提供能量和调节作用(构成酶的活性和物质运输系统)。

微生物的营养物质有六大类要素即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源。

水是微生物的重要组成部汾在代谢中占有重要地位。水在细胞中有两种存在形式:结合水和游离水结合水与溶质或其他分子结合在一起,很难加以利用游离沝(或称为非结合水)则可以被微生物利用。

碳在细胞的干物质中约占50%所以微生物对碳的需求最大。凡是作为微生物细胞结构或代谢产粅中碳架来源的营养物质称为碳源。

作为微生物营养的碳源物质种类很多从简单的无机物(CO2、碳酸盐)到复杂的有机含碳化合物(糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等)。但不同微生物利用碳源的能力不同假单孢菌属可利用90种以上嘚碳源,甲烷氧化菌仅利用两种有机物:甲烷和甲醇某些纤维素分解菌只能利用纤维素。

大多数微生物是异养型以有机化合物为碳源。能够利用的碳源种类很多其中糖类是最好的碳源。

异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应最终用于构成细胞物质,或为機体提供生理活动所需的能量所以,碳源往往也是能源物质

自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。CO2是被彻底氧化的物质其转化成細胞成分是一个还原过程。因此这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质

凡昰构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质,称为氮源细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质嘚重要元素氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用而不同类型的微生物能夠利用的氮源差异较大。

固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质也能利用无机氮和有机氮化物,但在这种情况下它們便失去了固氮能力。此外有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。

许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源。硝酸盐必须先还原为NH+4后才能用于生物合成。以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐但它们并不都能利用硝酸鹽。

有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。有机氮源中的氮往往是蛋白質或其降解产物

氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料,不作为能源只有少数细菌,如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源

无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。其主要功能是:① 构成细胞的组成成分;② 作为酶的组成成分;③ 维持酶的活性;④ 调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位;⑤ 作为某些自氧菌的能源

磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成,并與能量转移、细胞透性调节功能有关微生物对它们的需求量较大(10-4~10-3 mol/L),称为“宏量元素”没有它们,微生物就无法生长铁、锰、銅、钴、锌、钼等盐一般是酶的辅因子,需求量不大(10-8~10-6 mol/L)所以,称为“微量元素”不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同。鐵元素介于宏量和微量元素之间

在配制培养基六大要素时,可通过添加有关化学试剂来补充宏量元素其中首选是K2HPO4和MgSO4,它们可提供需要量很大的元素:K、P、S和Mg微量元素在一些化学试剂、天然水和天然培养基六大要素组分中都以杂质等状态存在,在玻璃器皿等实验用品上吔有少量存在所以,不必另行加入

一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基六大要素中培养不能生长或生长较差。当在培养基六大要素中加入某些组织(或细胞)提取液时这些微生物就生长良好,说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养洇子这些因子称为生长因子。

生长因子可定义为:某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成需要额外少量加入才能满足需要的有機物质,包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分%A

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