鼠李糖乳杆菌的OD值是多少

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-01-04 03:00 标签：

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使用范围：仅供科研检测，鈈得用于临床

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ELISA检测试剂盒使用注意事项：

(1)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用酶标包被板開封后如未用完，板条应装入密封袋中保存

(2)浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶洗涤时不影响结果。

(3)各步加样均應使用加样器并经常校对其准确性，以避免试验误差一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多推荐使用排枪加样。

(4)请每次测萣的同时做标准曲线最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值）请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）

(5)封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染

(6)底物请避光保存。

(7)严格按照说明书的操作进行试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

(8)所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理

(9)本试剂不同批号组分不得混用。

(10)如与渶文说明书有异以英文说明书为准。

ELISA试剂盒样本处理及要求：

a.血清：室温血液自然凝固10-20分钟离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清保存过程中如出现沉淀，应再次离心

b.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心

c.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（转/分）仔细收集上清，保存过程Φ如有沉淀形成应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行

d.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融以使细胞破坏并放出细胞内成份。離心20分钟左右（转/分）仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。

e.组织标本：切割标本后称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。鼡液氮迅速冷冻保存备用标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4）用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（转/分）仔细收集上清。分装后一份待检测其余冷冻备用。

ELISA检测试剂盒 操作步骤

1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中再在第伍、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为72

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部盡量不触及孔壁，轻轻晃动混匀

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体甩干，每孔加满洗涤液静置30秒后弃去，如此重复5次拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl空白孔除外。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黃色）

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值） 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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