学校有权利要求学生必须有12月11日核酸检测报告才能上学吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2022-12-11 13:56 标签： 12月11日核酸检测

1.一种双标记报告荧光多重病原体核酸检测方法，其特征在于，包括使用两种荧光基团，以及一种或两种淬灭荧光基团标记的探针，并使用该探针检测核酸。

2.根据权利要求1所述的检测方法，所述病原体，选自：呼吸道病原体、发热伴出疹病原体、感染性腹泻、食源重要病原体、虫媒传染病、人畜共患病原体、肝炎病毒、烈性传染病病原体。

3.根据权利要求2所述的检测方法，所述呼吸道病原体，选自：甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒、腺病毒、偏肺病毒、博卡病毒、冠状病毒、鼻病毒、肠道病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体、肺炎链球菌、流行性脑膜炎双球菌、军团菌、百日咳、副百日咳、结核分枝杆菌等病毒细菌及其亚型；发热伴出疹病原体选自：肠道病毒、风疹病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、疱疹病毒、伤寒副伤寒、细小病毒、巨细胞病毒、立克次体等病毒细菌及亚型；感染性腹泻及食源重要病原体选自：诺如病毒、札如病毒、轮状病毒、星状病毒、霍乱弧菌、致泻性大肠埃希菌、副溶血弧菌、弯曲曲、志贺氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌、假单胞菌等病毒细菌及其亚型；虫媒传染病选自：布尼亚病毒、登革热病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、寨卡病毒、基孔肯雅热病毒、疟原虫等病毒细菌及其亚型；人畜共患病原体、肝炎病毒选自：甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒；动物传染病原体选自：口蹄疫、猪瘟、伪狂犬、乙脑、猪细小、布鲁菌病、链球菌病、附红体病、猪肺疫、猪副伤寒、猪大肠杆菌病、狂犬病、蓝耳病、猪流感、猪痢疾、猪丹毒、猪喘气病、猪痘。

4.根据权利要求2所述的检测方法，所述病原体选自：甲型流感病毒(flua)，h1n1亚型流感病毒，h3n2亚型流感病毒，乙型流感病毒(flub)，bv亚型流感病毒，by亚型流感病毒。

5.根据权利要求2所述的检测方法，所述探针，其中包括两种荧光基团，称为双标记的报告荧光，所述报告荧光选自fam、hex/vic/hex/、tamra、cy3、cy5、cy5.5、texax、rox，所述淬灭荧光，选自bhq1、bhq2与bhq3；每个报告荧光可以是fam、hex/vic/joe、cy3、cy5、cy5.5、texax、rox任意两个标记的组合。

6.根据权利要求2所述的检测方法，所述的方法包括以下步骤：

病原样本类型包括拭子类、病毒培养物、细菌、真菌、组织、血浆、血清、全血、干血斑、粪便、环境样本，提取试剂可以用商品化试剂盒进行核酸提取，其方法可以是硅胶膜或磁珠法；

7.根据权利要求2所述的检测方法，所述的方法，其中步骤1的方法步骤如下：

1)取30μl拭子类临床样本，加入50μl核酸提取液中，混匀，90℃裂解4min；

2)干血斑样本，打6mm斑，加1ml去红细胞裂解液，室温放置3min，8000rpm离心3min，加入50μl核酸提取液，混匀，90℃裂解4min；

3)全血样本，建议取1－5*106白细胞，加入50μl核酸提取液，混匀，90℃裂解4min；

4)尿液样本建议取100μl尿液样本，8000rpm离心，去上清，沉淀加入50μl核酸提取液，混匀，90℃裂解4min；

5)粪便样本建议水样便采取200μl，成形便采取黄豆大小的粪量，加入900μlpbs，100μl氯仿，漩涡震荡5-10分钟，12000rpm离心2min，转移上清至另一干净、无核酸酶的ep管中；取30μl上清入50μl核酸提取液，90℃裂解4min；

6)污染严重的水源样本，建议5000rpm离心1-2min，转移上清30μl至50μl核酸提取液中，混匀，90℃裂解4min；

7)细菌真菌培养液10μl，或用牙签挑一菌斑至50μl核酸提取液中，混匀，90℃裂解4min；

8)取出加样管，瞬时离心，上清即是提取的核酸；

其中，步骤2的pcr方法，步骤如下：

1)根据病原的保守与特异区设计引物与探针，探针可以是同一条序列两种报告集团标记也可以是不同序列两种标报告集团标记；并交专业的公司合成；

2)根据合成公司的报告单，将引物与探针稀释成10-100mm；

3)进行pcr反应的调配：调配pcr缓冲液、酶、mg2+、dntps与引物探针的量；

pcr缓冲液终浓度：1×

引物与探针终浓度：50-500nm

其中，步骤3，荧光检测方法步骤如下：

扩增条件，针对rna病原可以使用以下程序

针对dna病原扩增程序如下：

其中，步骤4，定性计算方法，步骤如下：

8.一种试剂盒，所述试剂盒含有权利要求1-7任何一项权利要求中的所述的探针及其相关的试剂。

9.根据权利要求8的试剂盒，还包括以下成分：

其中，反应液：包括pcr缓冲液终浓度、dntps、mg2+、检测病原的引物与探针和无核酸酶水；

其中，酶混合液：包括taq聚合酶或/与rt逆转录酶及酶稀释液，按一定比例混匀；

其中，阳性对照：有无核酸酶水稀释的人工假病毒，分装成200ul/支；

其中，阴性对照：无核酸酶水，质检后分装。

10.权利要求9所述试剂盒的使用方法，步骤如下：

取出试剂盒，在室温下融化并漩涡震荡60秒后(酶不需要震荡)，6000rpm离心10秒；计算需准备反应试剂人份数n(n＝样本数+2管对照)；每人份反应体系配制如下：

试剂名称加样量(μl)/每人份adv反应液19taq聚合酶1总体积20

计算上述试剂的各使用量，充分混匀后，离心6000rpm10秒，按20μl的量分装到n个pcr反应管中；

取5μl(待测样本dna、阴性对照、阳性对照)分别加入pcr扩增管，反应总体系为25μl；

取出试剂盒，在室温下融化并漩涡震荡60秒后(酶不需要震荡)，6000rpm离心10秒；计算需准备反应试剂人份数n(n＝样本数+2管对照)；每人份反应体系配制如下：

试剂名称加样量(μl)/每人份反应液18酶混合液2总体积20

计算上述试剂的各使用量，充分混匀后，离心6000rpm10秒，按20μl的量分装到n个pcr反应管中；

取5μl(待测样本rna、阴性对照、阳性对照)分别加入pcr扩增管；

艾滋病病毒感染者和病人及其家属不受歧视，他们享有公民依法享有的权利和社会福利

艾滋病感染者和病人应当将其发病或感染的事实告诉配偶，在性生活时采取保护措施，避免配偶感染

艾滋病病毒感染者和病人应对社会承担起义务和责任，认真听取医务人员的医学指导服从卫生防疫部门的管理

对明知自己是艾滋病病毒感染者或病人而故意感染他人的违法行为，要负法律责任，应依法追究其法律责任

艾滋病病毒感染者和病人不享受普通公民依法享受的权利和社会福利

艾滋病感染者和病人应当将其发病或感染的事实告诉配偶，在性生活时采取保护措施，避免配偶感染

艾滋病病毒感染者和病人应对社会承担起义务和责任，认真听取医务人员的医学指导，服从卫生防疫部门的管理

对明知自己是艾滋病病毒感染者或病人而故意感染他人的违法行为，要负法律责任，应依法追究其法律责任。

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