求教Tail-PCR 中随机pcr引物计算器的设计

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求引物设计高手
我要从2809bp克隆2586bp的基因(2-2587) 1 catgattggt caaattacga gcggactatt tggtggccat gatgactcaa agaaagttaa
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怎么设计引物 谁能帮忙设计一下
用primer5在线的,可以试一下! : Originally posted by blackrose8089 at
用primer5在线的,可以试一下! 还在为引物设计头疼吗?还在为尝试引物浪费大量的宝贵时间吗?
I Prime是一支专业的引物设计团队,由四名美国生物科技博士以及博士后组成。我们有多年专业的引物分析,设计与使用的经验。我们竭诚为您提供最便捷,最有效的引物鉴定信息及专业的引物设计。我们的引物设计覆盖各种科研和诊断的需求,包括普通PCR,real-time PCR引物设计以及表观遗传学,外基因学,及用于克隆,测序的复杂引物设计,绝对保证引物工作。
详细服务内容如下:
1. 普通PCR引物设计 (RMB16元;第一对免费)
2. Real-time PCR引物设计(RMB25元;第一对免费)
3. 染色质免疫沉淀实验中,转录因子,结合序列,转录调节区,启动子相关研究的引物信息提供与设计(用于普通PCR,25元)
4. 染色质免疫沉淀实验中,转录因子,结合序列,转录调节区,启动子相关研究的引物信息提供与设计(用于real-time PCR,RMB32元)
5. 表观遗传学,外基因学研究相关的引物信息提供或设计
CpG island primer sets for regular PCR (RMB32元/对)
CpG island primer sets for methylation sensitive PCR (RMB38元/对)
CpG island primer sets for methylation specific PCR (RMB38元/对)
CpG island primer sets for methylated DNA immunoprecipitation (RMB38元/对)
CpG island primer sets for bisulfite sequencing (RMB60元/对)
Gene regulatory region or promoter primer sets for chromatin immunoprecipitation (RMB32元/对)
6. 分子克隆和测序的引物设计(包括Primer walking,primer sequencing等;价格视复杂程度而定。)
I Prime为您提供的专业服务,满足各种科研和诊断的需求。我们承诺保证引物工作。因调查需要,现提供第一对引物免费设计的优惠。
有需要的朋友请填写表格,将基因信息及引物设计的详细要求,以邮件的形式发送给我们。需要第一对引物免费设计服务的,请使用学术机构域名下的邮箱地址与我们联系。
I Prime祝各位学子学有所成!I Prime为您提供最温馨的帮助与支持!
联系我们: :cry::cry: 楼主是什么意思?是直接从起始密码子ATG设计引物吗?我也是新手,大家可以交流一下。 用primer5。或者省事点,找引物合成公司,很多都帮忙设计的 我设计了一个引物,你看看
& &也希望大家一起点评,参数都在上面
用Vector NTI11.5设计的 图片没上传成功??在给你个文件 不知道您要干什么用?是做表达吗?最好在你需要扩增的序列前面有一些保护碱基,如果还需要其他克隆的话估计还得添加限制性内切酶位点什么的吧。。。希望有所帮助 产物长度才不到200,,达不到&&他的要求,,GC很低啊tail pcr反应体系中为什么随机引物的量是特异性引物量的3倍_百度作业帮
tail pcr反应体系中为什么随机引物的量是特异性引物量的3倍
tail pcr反应体系中为什么随机引物的量是特异性引物量的3倍
TAIL-PCR的基本原理是利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(SPECIALPRIMER, 简称SP1,SP2,SP3,约20BP),用它们分别和1个具有低TM值的短的随机简并引物(ARBITRARYDEGENERATE PRIME,AD, 约14BP)相组合,以基因组DNA为模板,根据引物的长短和特异性的差异设计不对称的退火温度循环,通过分级反应来扩增特异引物。随机引物是不同引物...丁香园App是丁香园社区的官方应用,聚合了丁香园论坛和丁香客的精彩内容。医生可通过丁香园App浏览论坛,也可以在这个医生群集的关系网络中分享和互动,建立更广泛的学术圈子。
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【求助】求教Tail-PCR 中随机引物的设计
这个帖子发布于8年零174天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近在做Tail-PCR的时候设计引物,前面两次的时候由于保守性较高,我根据同源序列设计出兼并引物,可以预期扩增出想要的片段,但现在到了一段没有同源序列可以参照的时候,设计了引物却很难扩增,请教如何根据已经序列设计随机引物才能最大可能的提高扩增效率。
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现在takara好像推出一个试剂盒了吧
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丁香园中级站友
楼主我不太理解你的意思。tail pcr一般用于扩增一个基因的侧翼序列,从已知的序列开始设计三个特异的巢式引物,经过三轮反应,可以得到约200-1000bp的未知片段,没有见过用间并引物设计巢式引物的,总的间并性太高,很难得到扩增,请问您的实验目地是什么呢?另外,如果得到一段序列,就可以以这段序列为模板,再次设计巢式引物,扩增得到新的序列。“没有同源序列参”,我不是很明白,另外,随机引物是不变的。
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刘的tail的兼并引物的设计是需要依据保守区域设计的,如果blast没有,那你可以试试根据同家族的设计,只要亲源关系近就行了啊!另外刘对他的tail pcr进行了改进,叫什么高效率tailpcr,有师兄找刘反馈使用tail的情况,他就给寄来一篇对tail改进的文章,我看了哈子,兼并引物设计大大的不同!!!不过人家说还没发表.你需要可以联系刘,人很好,应该没问题.!!
不行就留下油箱! 我发你.
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bbmoo7,如果方便的话,给我发一篇吧!现在正晕着,不知道怎么设计AD引物呢?我设计哈茨木霉的,有什么建议吗
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我的email 是
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huangyali2291-----文章已发,包括刘的改进Tail和一篇SiteFinding-PCR(从园里下的)假期没怎么来这里,呵呵,有点迟,勿怪啊!感觉刘的改进方法和SiteFinding-PCR差不多,好像还没人家的好用,不过我现在不做Tail了,而且当时做的时候用的也是老方法。所以对新方法,只是感觉不错,具体实际操作中有什么问题,我不清楚!
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我曾经设计了一个NNNNNNNNATG的引物,用来作为tail中的随机引物,也能够扩增得到产物不过扩增的序列较短,在200到500之间,不知道是不是简并程度太高的原故
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