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安捷伦1100液相的维护
核心提示： 1．判断仪器脱气机是否正常：打开purge阀，流速设为2ml/min，然后提起过滤头，让体系进一些空气，再放下过滤头，看气泡是否会减
&& &1．判断仪器脱气机是否正常：打开purge阀，流速设为2ml/min，然后提起过滤头，让体系进一些空气，再放下过滤头，看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用；
& & 2．溶剂过滤头不可超声清洗，可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗；
& & 3．EDTA、乙二胺四乙酸等会对液相柱的不朽钢产生腐蚀；四氯化碳与2-异丙醇、四氢呋喃不可混合使用，但可单独使用；
& & 4．溶剂的使用：每两天更换或重新过滤溶剂（尤其是水，需要每天更换）；流动相过滤是为了去除微生物，一般水要放在棕色瓶中；
& & 5．判断purge阀的滤芯是否需更换：用水作流动相时，流速为5ml/min时，正常泵压应为0bar（若打开purge阀时，泵压超过10bar时需更换滤芯）；
& & 6．若用非极性溶剂作流动相，则需更换泵中起密封作用的&黑草帽&（适合反相的材料为石墨+聚四氟乙烯，而适合正相的为 ），而且必须一对同时更换，否则损坏更快；
& & 7．密封垫的冲洗：当流动相中盐的浓度大于0.01M时，可减少密封垫的磨损；用1%异丙醇溶液冲洗活塞杆中析出的盐（加异丙醇是为了防止细菌生长），流速设为3-5滴/min；泵开着，洗盐装置也须开着；
　8．泵头不可用超声清洗（可用乙醇、水清洗）、宝石杆不可超声，石英窗可用超声清洗；
　9．缓冲盐的通道放在比例阀的下面，只有两相的话，只用一边（盐在下面，有机相在上面）；
　10．双元泵为泵后混合方式（为高压混合方式，不易进气泡），而四元泵为低压混合方式；
　11．出口球型阀（outlet ball valve）可用超声清洗；
　12．双元泵有一个筛网（sieve）可控制低流速；
　13．流动相使用了缓冲盐，则必为反相柱（不可长时间用水冲），一般可冲20-30min，然后加入有机相（如甲醇），浓度逐步加大，直至100%甲醇；
　14．反相和正相转换时，一般要做溶剂过渡（最佳为异丙醇），因为粘度大，流速不可设太大，不要超过1ml/min（完全置换原来溶剂所需溶剂体积=体系体积（柱体积+1.5ml）&5）；
　15．比例阀内漏：抬起有嫌疑的通路，看管内流动相体积是否减少（抬起时同时打开purge阀）；
　16．泵压力不正常可能原因：气泡、主动阀故障、出口阀故障、密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞、比例阀故障、传感器故障、使用比例阀混合时盐浓度太高；
　17．自动进样：旁路状态、主路状态；手动进样：load状态至inject状态（最好满刻度进样，建议吸3倍以上进样体积），小体积进样则以小于1/2进样阀体积为佳；平时进样阀最好保持在inject状态（最右边状态）；
　18．进样流程：插针&&inject状态&&load状态&&进样（缓慢）&&inject状态&&拔出针（进样阀后有两根废液管）；
　19．VWD（可变波长）检测器：检测器后out废液管不可太短，否则流通池容易进气泡，也不可太长，否则易压碎流通池；
　20．DAD检测器（优势为优化条件方便）：最大波长选择&&要选择溶剂没有吸收的位置（避开约20nm）；VWD检测器的灵敏度略高于DAD检测器；滤光片中钬玻璃用于校准波长；若要检测器的灵敏度提高则要开大狭缝（二极管阵列前狭缝默认为4nm）；
　21．DAD检测器的氘灯可用于VWD检测器，但反之则不行；钨灯、氙灯寿命长，可随开随用，但&氘灯需要预热（10几分钟）（寿命为1000小时），1-2小时不用，不用关，还是开着更好，氘灯放时间长容易衰变&，灯可进行测试；
　22．测定条件设定：reference wave（流动相中溶剂的吸收）可以不设，梯度洗脱时参考波长要设，否则会导致基线漂移，DAD可选一个样品没吸收的波长作为参考光；band width（VWD设为光谱的半谱带宽度，而DAD检测器则不用设）（此范围内作色谱图可降低噪音，信噪比更好，但信号会降低）；参考波长选择原则：样品没有吸收，但靠近样品最大吸收的位置；参考光波长带宽必须大于或等于测量光波长带宽；DAD选条件时要存所有光谱图（spectrum）；氘灯（190-800nm），但有效范围为190-600nm，钨灯（470-950nm），若用470-800nm时两灯同开则强度加大；
　23．基线噪音大原因：泵压不稳、有气泡、柱污染；
　24．清洗在线脱气机及比例阀（尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路）：先用水冲洗，再用甲醇冲洗，可以打开purge阀，使用5ml/min的流速，也可用IPA清洗：A、Buffer B、MeoH C、Water D、CH3CN 分析：A:B:D=20:
　25．流动相大于9.5或小于2.3时，进样阀应更换tefzel转子密封，可耐受压：VWD(40bar)，MWD(120bar), FLD(20bar), RID(56bar)；RID,FLD永远是最后一个检测器；
编辑：songjiajie2010相关专题栏目
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主题：【第六届原创】安捷伦液相自动purge排气的操作技巧
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ID：kendon
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发表于： 11:13:48
维权声明：本文为kendon原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
安捷伦的液相没有自动purge排气的操作，一直是一个一个通道的切换，后来一想，既然能设梯度洗脱，应该就能自动切换通道清洗啊，试了一下，呵呵，可行，具体见下面操作。按如下方法设置，即可实现自动冲洗排气的操作。一、设置方法1、在泵上可设置如下参数： 2、在VWD上可设置如下参数：以上参数设置完之后，另存方法为purge.M.二、设置进样1、在单次进样样品信息上可设置如下参数：2、在序列进样样品信息上可设置如下参数：3、最后一步，放好溶剂瓶，打开purge阀，运行方法或序列，仪器自动进行冲洗排气了。无人值守啊，呵呵！！
该帖子作者被版主
石头底下的蛐蛐 加 4 积分，
2经验，加分理由：很不错
10:24:29 Last edit by emoc98311
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ID：<span class="gray0 username_54www
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楼主可以参加原创了哦，钻研的精神值得我们学习！
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ID：genghua
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真没试过，不错赶明试试
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ID：liufeilzu
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那个自动进样器的详细说说
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ID：yxh302
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这是哪个版本的软件
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ID：kendon
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chemstation B.04.03的，此操作，旧版的也适用的，呵呵
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ID：Brooks
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其实purge时最好还是有人在比较好，有些气泡需要人动手，拍拍管道啥的才能顺利被排走
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ID：doxw0323
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如果不是需要四个通道都用，就没必要如此操作，但这样操作是可行的。老版本也都有这个功能，问题是如何判断purge时，气泡都排出了。
zhaohua8011
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ID：zhaohua8011
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这个是安捷伦B.04.03版本的软件，界面有所变化内容变化不大！
yukepotato
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ID：yukepotato
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省去了切换的时间，呵呵。不过走样前还得记得回来哦！
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不错不错，楼主的创新精神可嘉！下载丁香园App送15丁当
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【推荐】Agilent1100液相基本操作步骤 (要求加分）
楼层直达：
这个帖子发布于11年零254天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
Agilent1100液相基本操作步骤
转贴自：安捷伦科技有限公司化学分析仪器部
Agilent1100液相基本操作步骤
(一)、开机：
1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC
通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面,
单击”View”菜单中的“Show Top
Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling
diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump
control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵， 关闭
11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。
（二）数据采集方法编辑：
1、开始编辑完整方法：
从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Data
analysis ”外的三项，单击Ok，进入下一画面。
2、方法信息：
在“Method
Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
单击Ok 进入下一画面。
3、泵参数设定：（以二元泵为例）
在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B)
,也可Insert
一行”Timetable” ,编辑梯度。在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
单击Ok进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:
选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 1.0ul
,洗瓶位置为6号。“Standard
Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with
Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use
program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。
点击Ok进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:
在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more&&”
键,如图所示,选中”Same
as left”---使柱温箱的温度左右一致。
点击ok进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:
在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,
在”Peak width
(Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如&0.1min
在Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min
，波长=300nm。点击ok进入下一画面。
7、DAD检测器参数设定:
检测波长: 254nm,BW=30nm,
参比波长=350nm,BW=100
检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW：
一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak
width（Response
time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。
点击Ok进入下一画面。
RID检测器参数设定:
进样体积: 20ul 。
光学单元温度:
极性: 正 。
峰宽(响应时间) :
如图所示: “Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off,
若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak
width”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after
analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。
***** 点击RID图标，选择RID
Control ：Heater
设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling
Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。
FLD检测器参数设定:
色谱条件：
用甲醇稀释为1:10。
进样体积：5ul。
EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
响应时间=4s.
停止时间： 出峰完毕。
Excitation A: 激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。
发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。
大多数应用适当的设定值为10,若高浓度样品峰被切平头,则减少 PMT 值。
“Peak width”：大多数应用设为4s，只有快速分析采用小的设定值。
Multi Ex ： 多波长及光谱（激发）。
Multi Em：多波长及光谱（发射）。
同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。
在“ Run time checklist ”中选中“Data acquisition”，单击Ok。
单击“Method”菜单，选中“Save method as”，输入一方法名，如“test”，单击Ok。
从菜单 “View”中选中”Online signal” ,选中Windows
1,然后单击Change
钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击Ok.(如同时检测二个信号,则重复12,选中
Windows 2)。
control ”菜单中选择“Sample
info”选项，如上图所示，输入操作者名称，在“Data
file ”中选择“Manual”或“Prefix”。
Manual--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
Prefix—在Prefix
框中输入前缀，在Counter 框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd0001，vwd0002……。
从Instrument 菜单选择System on。
等仪器Ready，基线平稳，从Method菜单中选择“Run method”，进样。
（DAD, VWD色谱图如下所示：）
（三）、数据分析方法编辑:
从“View”菜单中，单击“Data analysis”进入数据分析画面。
从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名，如下图所示。单击Ok。
做谱图优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项，。从Ranges中选择Auto
scale及合适的显示时间，单击ok,或选择”Use Ranges” 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。
(1)、从“Integration”中选择 “Auto
integrate”,如积分结果不理想,再从菜单中选择“Integration
Events”选项，选择合适的Slope sensitivity，Peak width，Area
reject，Height
(2)、从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项， 则数据被积分。
(3)、如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
(4)、单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。
5、打印报告:
(1)、从“Report”菜单中选择“Specify report”选项，进入如上画面。
(2)、单击“Quantitative
Results”框中Calculate右侧的黑三角，选中Percent（面积百分比），其它选项不变。
(3)、单击Ok.
(4)、从“Report”菜单中选择“Print
report”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则单击Report
底部的“Print”钮。
(四)、关机:
关机前，用
100%的水冲洗系统20分钟，然后用有机溶剂冲洗系统10分钟（如ACN），然后关泵，（适于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shut down关）。
关掉Agilent 1100电源开关。
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