全世金tunel凋亡tunel试剂盒说明书国产的能用吗

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罗氏(Roche)公司Tunel试剂盒操作说明书
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【求助】请问有人买碧云天的Tunel试剂盒做石蜡切片出过阳性结果没有
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这个帖子发布于5年零100天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近在做凋亡检测听说碧云天的东西还不错,我看价格很便宜(Tunel试剂盒20片1366)就买了他家的结果做了2次没有出结果(所用切片为人肝癌组织,凋亡应该很高的)然后买了他家的阳性对照,也没有出结果。请问有人买过他家的Tunel试剂盒没有,请高手指点具体步骤如下: 常规石蜡切片 脱蜡至蒸馏水洗蛋白酶K 37度 20min消化(20ug/ml)双蒸水洗 3*1min pbs洗3*3min 3%过氧化氢液(PBS配制)封闭10min ,后来延长封闭至20min双蒸水洗 3*1min pbs洗3*3min 生物素标记液 37度 60min孵育 pbs洗1次 反应终止液 室温 10min 双蒸水洗 3*1min pbs洗3*3min HRP工作液 37度 30min 双蒸水洗 3*1min pbs洗3*3min DAB 显微镜下控制显色20min(第一次未出阳性,用冰箱4度过夜显色仍未出阳性结果。今天显色30min还是未出结果)阳性对照有个别细胞胞浆着色的假阳性。阳性对照有个别细胞胞浆着色的假阳性。
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wu5547246 edited on
那最后用碧云天的出结果了吗?我现在也用碧云天的同样试剂盒做TUNEL呢。请指教...
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没有做出来,后来换成merck的tunel了
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请问你merck效果怎么样?贵不贵,你是做什么组织啊
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meck50片的4000左右,很贵,效果还不错,我做的是细胞,效果出来还不错
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第一次做TUNEL,我用的罗氏试剂盒,具体步骤如下,请大神帮忙看看!
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我细胞是在玻片上: 1.多聚甲醛固定1h,PBS漂洗; 2.triton-100 6min,PBS漂洗; 3.tunel反应液(1液:2液=1:9),37℃湿盒1h,PBS漂洗; 4.滴加DAPI进行观察。 问题是只能看到蓝色细胞,看不到绿色细胞。这是不是就是没有阴性结果?
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为什么图片不能插入?麻烦大家想象一下,蓝光时就是一片蓝点,绿光时就是一片漆黑。
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为什么图片不能插入?麻烦大家想象一下,蓝光时就是一片蓝点,绿光时就是一片漆黑。 你好,请问你现在做成功了吗?我看protocol是说Triton 2min
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想请问一下楼主 你们在哪里买到罗氏试剂盒的?谢谢
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楼主你买的罗氏的试剂盒含有,POD吗?
我买的罗氏的,貌似不带这个抗体。。
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tonks4869 想请问一下楼主 你们在哪里买到罗氏试剂盒的?谢谢楼上需要TUNEL试剂盒的话,可以找我,我这边目前还有。
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就是没染上
这个tunnel kit罗氏的不如全式金的好用
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我的更奇怪,我现在在做心肌细胞爬片的TUNEL染色,买的罗氏的TUNEL试剂盒,参照网上通用的方法(4%甲醛固定20min;20ug/ML蛋白酶K37℃通透10-15min;0.1%tritol x100室温破膜20-30min;TUNEL试剂1和2混合孵育37℃2小时或者4℃过夜;3%H2O2甲醇室温孵育15min;POD室温1小时或者37℃半小时;DAB显色;苏木素复染及后续脱水透明封片。中间每步均用PBS洗3min*3次。另外,蛋白酶K和tritol x100均用PBS配置。)重复做了3次,都是胞浆有着色,而胞核没有。为什么我通透做了2次,还进不到核里面去呢?
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