大DNA是小分子吗和碱基复杂的DNA复性较慢是不是真的

泉州师院化生学院生物系学年度苐二学期本科生物科学专业2003级《DNA是小分子吗生物学》期末试卷(C)

一、概念、术语的比较(30分每题5分)

1、DNA的变性与复性:

3、RNA的剪接与RNA的编輯:

4、转录因子与反式作用因子:

5顺式作用元件与启动子:

6、复制性转座与非复制性转座:

二、综合理解填空题(10分,每空0.5分)

1、染色体上嘚蛋白质主要包括组蛋白和非组蛋白根据其凝胶电泳性质可以把组蛋白分为及,其中及在氨基酸组成上的是极端保守的.

2核糖体上包括两個tRNA结合点:位点紧密结合与多肽链尾端连接的tRNADNA是小分子吗位点结合氨酰-tRNADNA是小分子吗.

3、在DNA合成中负责复制和修复的酶是- ,在DNA复制和修复過程中修补DNA螺旋上缺口的酶是大肠杆菌中有3种DNA聚合酶,其中是复制中链延长反应中的主导聚合酶真核生物有种DNA 聚合酶。

4. RNA聚合酶全酶的莋用是()的选择和转录的起始而核心酶的作用是()。

6、肽链合成终止时___________进人“A”位,识别出终止密码子同时终止因子使________的催化莋用转变为水解作用。

三、判断题(10分每题1分,正确的划√错误的划×)

2、核糖体大小亚基的结合和分离与Mg2+,的浓度有关( )

3、大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时,才能与mRNA结合( )

4、一种tRNA只能识别一种密码子。( )

5、大肠杆菌细胞中DNA链延伸的速度几乎是恒定的

6、线粒体囷叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。( )

7、RNA 聚合酶有校对功能()

8、真核基因组中,编码序列只占整个基因组的很小部分()

9、大肠杆菌的mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工( )

10、冈崎片段的合成需要RNA引物。( )

11、σ因子具有识别起始部位和催化RNA合成的功能( )

12、紫外线照射对DNADNA是小分子吗的损伤主要是形成共价连接的嘧啶二聚体( )

13、蛋白质生物合成的方向是从C→N端。( )

14、蛋白质合成所需能量来自ATP ( )

四、选择题(20汾,每题1分)

1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( )

蛋白质一级结构测定的原理

(1)疍白质样品的纯化:

(2)蛋白质DNA是小分子吗中多肽链数目的测定:根据末端分析测定蛋白质末端氨基酸残基数和蛋白质的DNA是小分子吗量可鉯确定蛋白质DNA是小分子吗中多肽链的数目

(3)氨基酸组成的分析:

2.N末端氨基酸的分析

(1)二硝基氟苯法(DNFB):蛋白质或多肽的N末端氨基與DNFB反应,生成DNP 多肽衍生物由于DNP基团与氨基形成的键对酸的稳定性比肽键高,因此当

DNP肽用酸水解时,所有肽键被水解生成相应的氨基酸囷DNP末端氨基酸这

样好像给N末端氨基酸以标记,以区别水解液中非N-末端氨基酸

(2)二甲氨基萘磺酰氯(DNS-Cl):方法的原理与DNFB法相同。

(3)Edman降解法:该法标记并仅仅水解释放多肽链N末端残基留下其他所有完整的肽链。

(4)氨肽酶法:这是一类肽链外切酶能从N-末端开始逐个切掉氨基酸。

3.C末端氨基酸的分析

(1)肼解法:多肽与无水肼加热发生肼解C-末端氨基酸以自由形式释放出,而其他氨基酸则生成相应的酰肼化合物

(2)羧肽酶法:羧肽酶是一类肽链外切酶,能特异地从C-末端将氨基酸依次水解下来

4.大DNA是小分子吗多肽氨基酸顺序的确定:先將大DNA是小分子吗多肽裂解为小的肽片,经分离纯化后分别

测定各肽片的顺序。一般常用化学裂解法和酶解法对肽链进行有控制的部分裂解可从已测出氨基酸顺序的小肽片段中找到关键性的“重叠顺序”,即可确定各小肽片在整个大DNA是小分子吗肽链中的位置从而推导出該大DNA是小分子吗肽链的氨基酸顺序。

5.核酸推导法:只要测出核酸的核苷酸顺序即可根据三个核苷酸确定一个氨基酸的密码

推导出蛋白质嘚氨基酸顺序。

维持蛋白质构象的化学键

(1)氢键是由一个电负性大的原子上的氢与另一个电负性大的原子相互作用而形成

一般多肪链Φ主链骨架上拨基的氧原子与亚氨基的氢原子所生成的氢键是维持蛋白质二级结构的主要次级键。而侧链间或主链骨架间所生成的氢键则昰维持蛋白质三、四级结构所需的

(2)疏水键是由两个非极性基团因避开水相而群集在一起的作用力蛋自质DNA是小分子吗中一些疏水基团洇避开水相而互相粘附并藏于蛋白质DNA是小分子吗内部,这种相互薪附形成的疏水键是维持蛋白质三、四级结构的主要次级键

(3)盐键又叫离子键。它是蛋白质DNA是小分子吗中带正电荷基团和负电荷基团之间静电吸引所形成的化学键

(4)配位键它是两个原子、由单方面提供囲用电子对所形成的化学键, 参与维持蛋白质的三、四级结构

(5) 二硫键它是由两个硫原子间所形成的化学键。在蛋白质DNA是小分子吗中它是两个半耽氨酸侧链的琉基脱氢形成

(6). 范德华引力这是原子、基团或DNA是小分子吗间的一种弱的相互作用力。维持蛋白质DNA是小分子吗的高级结构

选择性剪接是指透过对同一个基洇转录的相同pre-mRNA

使用不同的剪接选择产生不同的mRNA异构物,最后产

生多种相似却又独特的蛋白质或是产生出稳定性低的mRNA产物以达到调节基洇表现的目的。

15.I型内含子发生改变后可以产生其他酶的活性吗?

如果可以,是哪些活性?这意味着I型内含子的催化中心

答:可以这些活性包括:RNA聚合酶、内切核酸酶、磷

酸酶、连接酶的活性。将I 型内含子转变成这些酶的能

力表明它能结合于RNA的糖—磷酸骨架并能催化在它前

后嘚几个不同反应例如,连接是剪切的相反反应

16.转录涉及模板链和编码链的分离,解释在转录中单链DNA是怎样被保护的

答:转录过程中控板与编码链分离时,聚合酶覆盖了整

个转录泡——从解旋位点到螺旋重新形成位点因此单

链的DNA被保护起来。与复制不同转录不需要單链结

17.哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?

答: -35(RNA聚合酶结合位点)、-10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列和终止子;

18.原核生物与真核生粅启动子的主要差别?

19.一双链DNADNA是小分子吗如下图所示在体内它编码五个氨

试问:(1).哪条链是转录的模板链?

(2).写出该五个氨基酸残基的多肽

12.试证明一个基因中只有一条DNA链作为模板被转录。答:若基因两条链均被转录而RNA聚合酶只能以5’→3’方向合成,所以兩条DNA链会以相反方向转录两信使携带着彼此互补的反向核苷酸序列,编码不同的多肽虽然某些DNA顺序能被双方向转录,但这不是常见现潒最早的明确证据是通过研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillus subtilis)得到的。 SP8的DNA很特别:一条链(重链)富含嘌呤另一链(轻链)则富含嘧啶。若把双链DNA温和加熱两条链分离(即DNA变性),可用密度梯度离心分离两条链 1963年,Julius Marmur和Paul Doty用SP8感染枯草杆菌细胞后提取RNA发现它只能与噬菌体DNA的“重”链杂交(即互补配对形成DNA-RNA 杂合DNA是小分子吗)。而不会与轻链杂交显而易见,信使只可以与一条DNA链(重链)互补因而DNA双链中只有一条链作为转录的模板(图A7.8)。 Marmur和Doty佷幸运地选用SP8做实验因为它的全部基因都是同一条DNA链中转录而来。而另一些噬菌体包括T4和λ噬菌体,部分基因由一条链转录而其他基因则由另一条链转录;因此若用这些噬菌体而不是SP8做实验,则不能成功地说明问题

13.有一个被认为是mRNA的核苷酸序列,长300个碱基你怎样才能: (1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)确定它是真核还是原核mRNA

答:根据序列组成进行判断: (1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA应该含有许多特殊元件,如:假尿嘧啶和5—甲基胞嘧啶;同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一個相应的终止密码子构成的可读框。 (2)所有的真核生物mRNA在5’端都含有一个7—甲基鸟苷而且大多数还在3’端有一个长的po1yA 尾巴。这些都是原核苼物mRNA所不具有的但是原核生物mRNA靠近5’端有l—个核糖体结合序列(SD序列)。

22、详述怎样加工才能使真核生物mRNA 成熟

1、5’端加帽成熟真核生物mRNA,其结構5’端形成-m7GpppmXpYp-帽子结构

2、3’端加尾多数真核生物mRNA3’端都有多聚(A)尾长约100-200个核甘酸。

二、真核生物mRNA的剪接

剪接就是在细胞核中除去 hnRNA中的內含子,并在连接酶的作用下将外显子各部分连接起来的过程。此过程有如下特点:

(1)mRNA前体的剪切部位是在内含子末端的特定部位已发現大多数内含子都以GU为5'端的起始,而其末端则为AG-OH-3’因此把5'GU.....AG-OH-3'称为剪接接口(splicing junction)或边界序列。剪接后GU或AG不一定被剪除掉。

(2)套索结构的形成及剪接剪接过程分两步反应进行

B、内含子以套索形式被剪切下

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