• 吕乐琪抗坏血酸的性质及国标测定方法简介目录抗坏血酸的性质及国标测定方法简介1一、CNS_/bbsfiles/images/786__/bbsfiles/images/597__/bbsfiles/images/873__/bbsfiles/images/996_618_.png5.试样溶液的测定对试样溶液进行测定,根据标准曲线得到测定液中L(+)-抗坏血酸的浓度(μg/mL)。6.空白试验空白试验系指除不加试样外,采用完全相同的分析步骤、试剂和用量,进行平行操作。3.2.4结果计算试样中L(+)-抗坏血酸的含量和L(+)-抗坏血酸总量以毫克每百克表示，X-试样中L(+)-抗坏血酸的含量,单位为毫克每百克(mg/100g) C1-样液中L(+)-抗坏血酸的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL) .Co-样品空白液中L(+)-抗坏血酸的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL) V-试样的最后定容体积,单位为毫升(mL) m-实际检测试样质量,单位克(g) 1000-换算系数(由μg/mL换算成mg/mL的换算因子 F-稀释倍数(若使用6.3还原步骤时,即为2.5) K-若使用6.3中甲醇沉淀步骤时,即为1.25 100-换算系数(由mg/g换算成mg/100g的换算因子。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。3.2.5特点（1） 高压。在高效液相色谱系统当中，泵的输出高压能够为载液的流动提供动力，不仅能够有效提升载液的流动速度，而且能够有效提升分离速度。（2） 高速。由于高效液相色谱系统采用了高压输送的方式，使得溶质检测的速率得到了大幅度的提升。通常情况下，样品的检测可以在数十分钟之内即可完成，有些样品甚至只需要短短的几分钟即可完成检测。高效液相色谱法的高速特点是其他分离技术所达不到的，这是高效液相色谱法最为突出的优点之一。（3） 高效。高效液相色谱法的高效特点是指其具有较高的分离效能。高效液相色谱法利用不同溶质在不内向与流动相之间分配不同来实现溶质的分离，且同时可以对多种溶质进行分离。与此同时，其在分离效果上也有着十分优异的表现，甚至能超过工业精馏塔的分离效能。（4） 高灵敏度。高效液相色谱系统的检测器精度可以达到0.01ng。（5） 应用范围广。高效液压色谱法可以满足绝大多数有机化合物的分离与分析。除此之外，高效液相色谱法还具有分析选择灵活的特点。对于不同溶质的检测，通过选择合适的流动相，可以使得溶质的分离速度与效果更加良好。（6） 适用于乳粉、谷物、蔬菜、水果及其制品、肉制品、维生素类补充剂、果冻、胶基糖果、八宝粥、葡萄酒中的L(+)-抗坏血酸、D(-)-抗坏血酸和L(+)-抗坏血酸总量的测定3.3荧光法测抗坏血酸含量3.3.1原理维生素C自身没有荧光，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，再与邻苯二胺(OPDA)反应产生具有荧光的喹喔啉，其荧光强度与维生素C的浓度在一定范围内呈线性关系，以此测定试样中L(+)-抗坏血酸总量。3.3.2仪器与试剂1. 荧光分光光度计:具有激发波长338nm及发射波长420nm。配有1cm比色皿。3.3.3实验步骤1.样品的制备称取约100g(精确至0.1g)试样,加100g偏磷酸-乙酸溶液,倒入捣碎机内打成匀浆,用百里酚蓝指示剂测试匀浆的酸碱度。如呈红色,即称取适量匀浆用偏磷酸-乙酸溶液稀释 若呈黄色或蓝色,则称取适量匀浆用偏磷酸-乙酸硫酸溶液稀释,使其pH为1.2。匀浆的取用量根据试样中抗坏血酸的含量而定。当试样液中抗坏血酸含量在40pg/mL~100μg/mL之间,一般称取20g(精确至0.01g)匀浆，用相应溶液稀释至100mL,过滤,滤液备用。2. 样品的测定2.1氧化处理分别准确吸取50mL试样滤液及抗坏血酸标准工作液于200mL具塞锥形瓶中,加入2g活性炭,用力振摇1min,过滤,弃去最初数毫升滤液,分别收集其余全部滤液,即为试样氧化液和标准氧化液,待测定。分别准确吸取10mL试样氧化液于两个100mL容量瓶中,作为“试样液”和“试样空白液”。分别准确吸取10mL标准氧化液于两个100mL容量瓶中,作为“标准液”和“标准空白液”。于“试样空白液”和“标准空白液”中各加5mL硼酸-乙酸钠溶液，混合摇动15min,用水稀释至100mL,在4C冰箱中放置2h~3h,取出待测。于“试样液”和“标准液”中各加5mL的500g/L乙酸钠溶液,用水稀释至100mL,待测。2.2标准曲线的制备准确吸取上述“标准液”0.5mL,1.0mL,1.5mL,2.0mL,分别置于10mL具塞刻度试管中,用水补充至2.0mL。另准确吸取“标准空白液”2mL于10mL带盖刻度试管中。在暗室迅速向各管中加入5mL邻苯二胺溶液,振摇混合，在室温下反应35min,于激发波长338nm、发射波长420nm处测定荧光强度。以“标准液”系列荧光强度分别减去“标准空白液”荧光强度的差值为纵坐标,对应的L(+)-抗坏血酸含量为横坐标,绘制标准曲线或计算直线回归方程。2.3试样测定分别准确吸取2mL“试样液”和“试样空白液”于10mL具塞刻度试管中,在暗室迅速向各管中加入5mL邻苯二胺溶液，振摇混合,在室温下反应35min,于激发波长338nm、发射波长420nm处测定荧光强度。以“试样液”荧光强度减去“试样空白液”的荧光强度的差值于标准曲线上查得或回归方程计算测定试样溶液中L(+)-抗坏血酸总量。3.3.4结果计算试样中L(+)-抗坏血酸总量,结果以毫克每百克表示:X一试样中L(+)-抗坏血酸的总量,单位为毫克每百克(mg/100g) c一由标准曲线查得或回归方程计算的进样液中L(+)抗坏血酸的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL) V一荧光反应所用试样体积,单位为毫升(mL) m一实际检测试样质量,单位克(g) F一试样溶液的稀释倍数 100一换算系数 1000一换算系数。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。3.3.5特点荧光分析是一种先进的分析方法，它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及，这同荧光分析具有很多优点分不开的。(1) 荧光分析所用的设备较简单，如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍(2) 荧光分析的最大特点是：分析灵敏度高、选择性强和使用简便。同时具备这三大特点的仪器并不多。在紫外线照射下能直接发射荧光的化学元素并不很多，所以对一些元素进行荧光分析时大部分采用间接测定法，这就是用有机试剂与被测定的元素组成络合物。这些络合物在紫外线照射下能发射出不同波长的荧光素，然后由荧光强度测定出该元素的含量。由于有机荧光试剂的品种繁多，用荧光分析可测定的元素有六十多种。(3) 适用于乳粉、蔬菜、水果及其制品中L(+)-抗坏血酸总量的测定4、 参考文献1. 翟中和，王喜忠，丁明孝．细胞生物学第四版．北京：高等教育出版社，2011：3742. 王放．食品营养保健原理与技术：中国轻工业出版社，19963. 邹纯才．“十三五”规划教材药物分析第2版：江苏科学技术出版社，2018.02：173-1744. 胡秋红，许丽遐主编．食品营养与卫生：北京理工大学出版社，2011.02：54-555. 李彩云,李洁,严守雷,王清章.抗坏血酸在食品中应用的研究进展.食品科技,):228-232.6. 王传芬,韩玉,王英博,王梦洁,王小君,马文皎.果蔬中维生素C含量的测定及比较.农业与技术,):44-46.7. 李书静，李可，姚新建，等．2，6－二氯靛酚钠测定果汁饮料中维生素C．光谱实验室，2011，28(05):2391－2394．8. 梁云贞，董佩佩，黄秋婵．测定果蔬中维生素C含量的实验教学改革———2，6－二氯酚靛酚法．教育教学论坛，9－280．9. 王春华.高效液相色谱技术在食品质量检测中的应用.现代面粉工业,):22-24.10. 王军锋,李思佳,王晓兰.荧光法测石榴中维生素C.山东化工,):44-46.11. 抗坏血酸结合自发气调包装对灵武长枣贮藏品质和抗氧化性的影响. 刘慧,张静林,刘杰超,张光弟,方海田,张强,焦中高. 食品科学. . 4-HR与抗坏血酸对中华管鞭虾多酚氧化酶的抑制动力学模拟分析. 周宇芳,胡建坤,郝云彬,相兴伟,杨会成,郑斌,肖金星. 食品科学. . 儿茶素异构化的促进和抑制因素研究. 张丹,许兰,唐李俊,李博,屠幼英. 天然产物研究与开发. . 抗坏血酸对蛋白基美拉德反应产物的性质影响. 高维,刘刚. 食品科技. . L-抗坏血酸对面团特性的影响. 张磊. 现代面粉工业. . 抗坏血酸、谷胱甘肽及半胱氨酸对α-淀粉酶及其光谱性质的影响. 高义霞,王济沧,张继. 广东农业科学. . 乙醇、氯化钙和抗坏血酸对大豆分离蛋白凝胶性质的影响. 王婵秋,迟玉杰. 中国粮油学报. . 冰温技术结合保鲜剂对南美白对虾品质的影响. 凌萍华,谢晶. 食品科学. .

　　在化学学科的理解中，除杂就是出去杂质。那么你知道9年级化学除杂知识点有哪些吗？下面是学习啦小编为您带来的9年级化学除杂知识点，希望对大家有所帮助。

　　9年级化学除杂知识点：除杂

　　1、气态烷(气态烯、炔)

　　除杂试剂：溴水、浓溴水、溴的四氯化碳溶液

　　注意：酸性高锰酸钾溶液不可。

　　原理：气态烯、炔中不饱和的双键、叁键可与上述除杂试剂发生反应，生成不挥发的溴代烷

　　2、汽油、煤油、柴油的分离(说白了就是石油的分馏)

　　除杂试剂：物理方法

　　原理：各石油产品沸点范围的不同。

　　3、乙烯(CO2、SO2、H2O、微量乙醇蒸气)

　　除杂试剂：NaOH溶液 - 浓硫酸

　　原理：CO2、SO2可与NaOH反应生成盐而被除去，乙醇蒸气NaOH溶液中的水后溶被除去，剩余水蒸气可被浓硫酸吸收。

　　除杂试剂：CuSO4溶液 - 浓硫酸

　　原理：H2S、PH3可与CuSO4溶液反应生不溶物而被除去，剩余水蒸气可被浓硫酸吸收。

　　5、甲烷、一氯甲烷、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷的分离

　　除杂试剂：物理方法

　　除杂试剂：NaOH溶液

　　原理：Br2可与NaOH溶液反应生成盐，系强极性离子化合物，不溶于苯而溶于水(相似相容原理)。

　　7、硝基苯(HNO3、水)

　　除杂试剂：水、 操作：分液

　　原理：等于是用水萃取硝基苯中的硝酸，具体原理见“萃取”。 TNT、苦味酸除杂可使用相同操作。 8、气态卤代烃(卤化氢) 除杂试剂：水

　　操作：洗气(需使用防倒吸装置)

　　原理：卤化氢易溶于水，可被水吸收，气态卤代烃不溶于水。 9、乙醇(水或水溶液) 除杂试剂：CaO、碱石灰 操作：蒸馏

　　原理：CaO与水反应生成不挥发的Ca(OH)2，故只会蒸馏出无水的乙醇。 10、苯(苯酚)

　　除杂试剂：NaOH溶液 操作：分液

　　原理：苯酚可与NaOH溶液反应生成苯酚钠，系强极性离子化合物，不溶于苯而溶于水(相似相容原理)。

　　11、乙酸乙酯(乙醇、乙酸、水)

　　除杂试剂：浓硫酸+饱和Na2CO3溶液 操作：蒸馏+分液 原理：乙酸与乙醇发生可逆的酯化反应生成乙酸乙酯和水，四者共同存在于反应容器当中。由于存在催化剂浓硫酸，所以水、乙醇不会被蒸发出体系，此时乙酸与乙酸乙酯同时被蒸发出体系，并冷凝滴入盛有饱和碳酸钠溶液的容器中，乙酸与碳酸钠反应生成溶于水、不溶于乙酸乙酯的乙酸钠，从而与乙酸乙酯分开。下一步只需要进行分液即可除去水溶液，得到乙酸乙酯。

　　12、乙酸乙酯(水或水溶液) 除杂试剂：物理方法 操作：分液

　　原理：二者密度不等，且不互溶。

　　9年级化学除杂知识点：物质的除杂

　　1、CO2(CO):把气体通过灼热的氧化铜

　　2、CO(CO2):通过足量的氢氧化钠溶液

　　3、H2(水蒸气):通过浓硫酸/通过氢氧化钠固体

　　4、CuO(Cu):在空气中(在氧气流中)灼烧混合物

　　5、Cu(Fe) :加入足量的稀硫酸

　　6、Cu(CuO):加入足量的稀硫酸

　　16、CO2(水蒸气):通过浓硫酸。

　　9年级化学除杂练习题

　　1、在分开盛放的A、B两溶液中，共含有Na+、Cu2+、Ba2+、Mg2+、OH-、NO3-、 SO42-七种离子两溶液中所含离子各不相同，已知A溶液里含三种阳离子和两种阴离子，其余在B溶液里，则B溶液里所含离子应该是_____________。

　　2、分离NaCl、FeCl3和BaSO4的混合物，应选用的一组试剂是( )

　　3、欲除去下列各物质中的少量杂质(括号内的物质为杂质)，同时，又不能引入新的杂质，分别写出所加试剂和发生反应的化学方程式。

　　4、除去NaOH中混有的少量Na2CO3杂质，可加入试剂( )

　　5、下列试管内壁的物质能用括号内所给试剂除去的是( )

　　A. 盛石灰水后留下的固体(氢氧化钠溶液)

　　B. 用足量H2还原CuO后留下的光亮红色固体(稀盐酸)

　　C. 盛过植物油的试管(热碱液)

　　D. 氯化铁溶液和氢氧化钠溶液反应后留下的固体(水)

　　6、下列物质中，不能与Na2CO3溶液发生反应的是( )

　　7、下列各组物质的溶液，两两混合都能发生反应的一组是( )

　　8、硫酸钠溶液中含有少量碳酸钠杂质，除去该杂质可加入适量( )

　　9、为了除去KCl溶液中含有的少量FeCl3和K2SO4杂质，应依次加入的试剂( )

　　A. 先加入适量AgNO3溶液，再加入适量BaCl2溶液。

　　B. 先加入适量BaCl2溶液，再加入适量AgNO3溶液。

　　C. 先加入适量KOH溶液，再加入适量Ba(NO3)2溶液。

　　D. 先加入适量KOH溶液，再加入适量BaCl2溶液。

　　10、某溶液中大量含有Ag+，Cu2+，Ba2+，三种阳离子中的两种离子和NO3-，Cl-，OH-，CO32-四种阴离子中的两种离子,溶液中大量含有的四种离子应该是( )

　　11、除去硝酸中混有的少量盐酸，可加入的试剂是( )

　　12、除去铜粉中混有的少量氧化铜，其主要操作过程是( )

　　A. 加入过量稀H2SO4微热后，过滤，洗涤。 B. 加强热或在空气中灼热。

　　C. 加适量水，加热，过滤，洗涤。 D. 加适量稀H2SO4微热，过滤，洗涤

　　13、工业上食盐水的精制是为了除去粗盐中的Ca2+，Mg2+，SO42-及泥沙，可将粗盐溶于水，然后进行下列五项操作： ① 过滤 ② 加过量的NaOH溶液 ③ 加适量的HCl ④ 加过量的Na2CO3溶液 ⑤ 加过量的BaCl2溶液。正确操作顺序是( )

　　A. ①④②⑤③ B. ④①②⑤③ C. ②⑤④①③ D. ⑤④①②③

　　14、将下列试剂分别滴入硝酸铜溶液，碳酸钠溶液和稀盐酸中，能区分这三种试剂的是( )

　　A. 氢氧化钾溶液 B. 氯化钡溶液 C. 氢氧化钙溶液 D. 氯化钾溶液

　　15、在不用指示剂的条件下，欲将含有盐酸的氯化钡溶液由酸性变为中性，应选用的最佳试剂是( )

　　A. 氢氧化钡溶液 B. 硝酸银溶液 C. 碳酸钡粉末 D. 生石灰粉末

　　16、 某工厂的废渣中混有少量的锌粒和氧化铜(成分不跟酸反应)，与大量废盐酸接触能形成污水，产生公害，若向污水中撒入铁粉，且反应后铁粉有剩余，此时污水中一定含有金属离子是( )

　　17、当土壤的pH值为4时，农作物不能生长，现要改良它，应撒施的物质是( )

　　18、某溶液中存在Mg2+、Ag+、Ba2+三种阳离子，现用NaOH，Na2CO3和NaCl三种溶液使它们转化为沉淀并分离出来，要求每次只加一种溶液，滤出一种沉淀，则所加溶液的顺序正确的是( )

　　19、某溶液中滴加BaCl2溶液，产生不溶于稀HNO3的白色沉淀，则该溶液中可能含有的离子是( )

　　20、现有以下几项操作：① 加适量盐酸 ② 加适量水溶解 ③ 过滤 ④ 高温或加热灼烧 ⑤ 蒸发，请选择合适的操作，以除去下列各物质中含有的少量杂质，并将其标号按操作的先后顺序填在横线上。

　　B. 除去生石灰中的碳酸钙，应_________。

　　21、不能用降低温度的方法使溶质从饱和溶液中析出的是? ?

　　22、要从CaCO3、KNO3和少量NaCl三种物质组成的混合物中分离出CaCO3和KNO3,加适量的水搅拌后，正确的分离方法是( ) ? ?

　　A、先结晶再过滤 B、先过滤再结晶 C、只需过滤 D、只需结晶

　　23、在粗盐提纯实验中，蒸发时用玻璃棒搅拌所起的作用是( )

　　A.加快固体溶解 B.防止液体局部过热 C.引流 D.转移固体

　　(1)质量百分比浓度：用溶质的质量占全部溶液质量的百分比来表示的浓度。简称百分浓度。

　　(2)体积百分比浓度：用溶质的质量占溶剂体积的百分比来表示的浓度。在工农业生产中常用这种浓度。

　　(3)体积比浓度：液体试剂相互混和或液体试剂用水稀释时常用此法。例如，1∶3酒精溶液指的是1体积的酒精和3体积的蒸馏水混和而成的酒精水溶液，1∶3中的前一个数字指的是溶质的体积数，后一个数字指的是溶剂的体积数。

　　(4)物质的量浓度：用1升溶液里含有溶质的量来表示的溶液浓度。目前习惯称摩尔浓度，用M表示。

　　(5)当量浓度：用每升溶液里所含溶质的克当量数表示的浓度。通常用N表示。

　　常用酸、碱、盐溶液的配制

　　1.30%丙烯酰胺溶液

　　【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。

　　【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt)，搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。

　　2.40%丙烯酰胺

　　【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。

　　【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。

　　3.放线菌素D溶液

　　【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。

　　【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。

　　药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。

　　【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。

　　6.10%过硫酸铵溶液

　　【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。

　　【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃

　　8.2×BES缓冲盐溶液

　　【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节　该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。

　　【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl₂?6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。

　　【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌，然后骤冷至0℃。

　　【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl₂?6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

　　【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

　　12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

　　【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节　每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测)，把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H₂O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节　溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。

　　【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。

　　【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于室温。

　　【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。

　　【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3)，在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

　　【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。

　　【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl₂?6H₂O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。

　　【注意】MgCl₂极易潮解，应选购小瓶(如100g)试剂，启用新瓶后勿长期存放。

　　【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。

　　【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。

　　【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。

　　【配制方法】把酚和lv仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。

　　【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

　　【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节　为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

　　23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

　　【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中，用2mol/L乙酸调节　pH值至7.5后加入纯水定容到1L，保存于-20℃。

　　25.乙酸钾溶液(用于碱裂解)

　　【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。

　　【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节　pH值至5.2或用稀乙酸调节　pH值至7.0，加水定容到1L，分装后高压灭菌。

　　【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　【配制方法】在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节　溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。

　　【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10%SDS溶液无须灭菌。

　　【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/l NaOH溶液调节　pH值至7.0，加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

　　【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节　pH值至所需值。应使溶液冷至室温后方可后调定pH值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　【注意】如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。

　　尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.1mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐40g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.05mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐20g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.02mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐8g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。标定：

　　0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液，取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.25g±0.0001g，用少量水湿润，加2ml稀盐酸20%使其溶解，加水100ml，用10%氨水调至PH=7～8，加10ml氨—氯化铵(pH=10)及铬黑T指示剂，用配制好的乙二胺四乙酸二钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白。

　　C(EDTA)——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液量浓度 mol/L

　　V1——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

　　V2——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

　　0.08138——与1.00ml乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液1.000mol/L相当的以克表示的氧化锌的质量

　　附：其他常用溶液的配制

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节　溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。

　　【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。

　　【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用2当量NaOH调节　溶液的pH值至8.0然后定容至1L。

　　使用时稀释一百倍变成1mMol/l EDTA工作液。PH值调至8

　　2.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液