提DNA没有PVP-40用PVP-30可以吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-10-25 01:42 标签： pvp40作用
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DNA的提取和纯化
各位高手我最近在提DNA，刚刚接触，大家有没有人知道DNA提取过程中的PVP和tris-饱和酚的作用是什么啊，可不可以给我说一说啊？
首先谢谢你的详细讲解，那DNA提取的时候可不可以同时都加PVP和Tris饱和酚？如果可以的话，那pvp是用来去除酚类物质的，再加Tris饱和酚，岂不是又加入了酚类物质，这不是互相矛盾？！
PVP的用途主要是在配置CTAB时用的，你使用改良的CTAB法提取DNA的嘛？
CTAB 提取液（PH 8.0）的配方如下：称取CTAB 2 g，PVP 2 g，加蒸馏水40ml，加1M Tris-cl（PH8.0）10ml，0.5M EDTA（PH 8.0）4ml和5M NaCl 28ml,待CTAB溶解后用蒸馏水定容到100ml（提取前加入2%的巯基乙醇，100ml加0.2ml巯基乙醇）
弱弱的问一句，CTAB 提取液（PH 8.0）的配方不是就是加1M Tris-cl（PH8.0）10ml，0.5M EDTA（PH 8.0）4ml和5M NaCl 28ml然后定容到100ml吗？怎么还会有CTAB2g呢？
再问一句，抽提的时候用的是25:24：1还是24:1？因为我是在想PVP是除酚类物质的，再加tris饱和酚的话是不是有点矛盾呢？
酚：氯仿：异戊醇=25：24：1，三者的比例就是这样，一般第一次加酚，其余抽提只用氯仿和异戊醇，这样可以把酚除掉
就是说第一次用25:24:1抽提，第二次用24：1抽提？
PVP去除的是植物中的酚类物质，后面加的饱和酚是苯酚不一样的
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提取DNA缓冲液（CTAB法）: 2% CTAB(W/V),100 mmol/L Tris-HCI pH 8.0, 20 mmol/L EDTA pH 8.0, 1.4 mol·L-1 NaCl，2% PVP (灭菌后加入2% PVP ，使之充分溶解）。在研磨叶片前加入1%（V/V）&-巯基乙醇。
PVP 在灭菌前加入 ，和灭菌前加入有什么区别吗？？？还是效果一样，？？
&-巯基乙醇 加入是加入到CTAB溶液中，还是直接加入ep管中呢？想问一下，&-巯基乙醇可不可以在实验台上直接操作，？
本人想 PVP灭菌前加入一起灭菌， &-巯基乙醇在灭菌后加入到100ml
2％CTAB中，每次使用前，65度水浴加热，想问的是 加热会不会影响&-巯基乙醇，因为好像这个易挥发的 ？？？而且有毒。
&-巯基乙醇倒底怎么操作为好？？？？都说使用前加入？？好像时间长了会失效，？还是每次用多少CTAB，再临时加入&-巯基乙醇，这样是比较麻烦。
该用户从未签到
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PVP为一种水溶性高分子聚合物,化学名称为聚乙烯吡咯烷酮，是一种有机物。
个人认为不适合提前加入和CTAB提取液一起高压灭菌。
我们实验室是灭菌后加PVP和巯基乙醇,每次用前65度水浴。加CTAB时应在通风橱中进行。
该用户从未签到
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同意楼上的
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生物秀进士
巯基乙醇是抗氧化剂，用前加入，用CTAB前先大致算好要用多少，量取后按量加入巯基乙醇即可
该用户从未签到
请问1楼，CTAB的毒性很强吗？有什么危害啊？
该用户从未签到
请问一下 我在提取DNA的时候把巯基乙醇的量加少了 后来才发现，我只加了千分之二，实际应该是百分之二！
我刚水浴了一个小时加了千分之二巯基乙醇的CTAB，现在我又加入了百分之二的巯基乙醇。不知道是不是起作用。
另：如果加少巯基乙醇出来的DNA会怎么样？
& &谢！！！
该用户从未签到
该用户从未签到
andi999 发表于
PVP为一种水溶性高分子聚合物,化学名称为聚乙烯吡咯烷酮，是一种有机物。
个人认为不适合提前加入和CTAB提 ...
请问你们是灭菌后往提取液中加PVP的粉末还是先用水溶了再加？或者是和样品一起研磨？谢谢
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andi999 发表于
PVP为一种水溶性高分子聚合物,化学名称为聚乙烯吡咯烷酮，是一种有机物。
个人认为不适合提前加入和CTAB提 ...
你好 我想问一下 2%PVP怎么配制
该用户从未签到
PVP有两种 一种是难溶的 一种是易溶的 我定的一种是难溶的 不过后来定的PVP-40却很容易溶解 我一般将难溶的在灭菌前加入 可溶的在灭菌后加入 看你的是易溶的还是难溶的 只能加一种 不过难溶的就算灭完菌还是不能完全溶解 不知道咋回事 所以每次用前混匀就行 我觉得灭菌前后加没啥区别 2%就是体积比 100ML加2gPVP 如果你配置的CTAB量大 而且提取的样多 短时间内就能用完 你就按照体积比把巯基乙醇直接加到CTAB里就行了 不然每次往EP管里加很麻烦 如果样少 就在使用前加 加了巯基乙醇的CTAB不宜长时间存放 应尽快用完 由于巯基乙醇非常臭 而且有毒性 所以操作的时候最好在通风橱里进行 5楼的童鞋不用担心 CTAB就是洗脱剂 毒性不是很大 不过巯基乙醇有毒性 使用时要注意！
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murongxiaoxiao大叔级摄影爱好者，喜欢分享绝对零度积极有责任心，热心公益事业yiii红米达人，爱拍照的北京女孩
逛了这许久，何不进去瞧瞧？pvp中的pvp30和pvp40有什么区别啊? 注：pvp为聚乙烯基吡咯烷酮
落落为君7853
下次问问题记得选分类.pvp也是魔兽世界的术语所以你问错地方了.
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